斑馬魚尾鰭細胞細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白

重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)

重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)

重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽)

重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)

重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽)

重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)

重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標簽)

重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)

重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)

重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標簽)

重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (Fc 標簽)

重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標簽)

重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標簽)

重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)

重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)

重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)