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兔糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)elisa試劑盒?操作步驟

時間:2023/3/15閱讀:258
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兔糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)elisa試劑盒操作步驟:

1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

 銀杏內(nèi)酯B英文名稱:Ginkgo biloba B號:15291-77-7分子式:424.39856

 銀杏內(nèi)酯C英文名稱:Ginkgo biloba C號:15291-76-6分子式:440.39796

 銀杏內(nèi)酯J英文名稱:Ginkgo biloba J號:107438-79-9分子式:424.39856

 銀杏酸(C13:0)英文名稱:Ginkgo biloba (C13:0)號:20261-38-5分子式:320.4698

 銀杏酸(C15:1)英文名稱:Ginkgo biloba (C15:1)號:22910-60-7分子式:346.5076

 銀杏酸(C17:1)英文名稱:Ginkgo biloba (C17:1)號:分子式:374.5612

 吲哚醇英文名稱:Alcohol號:2380-86-1分子式:133.15

 隱丹參酮英文名稱:Implicit Salvia號:35825-57-1分子式:296.3603

 隱綠原酸英文名稱:Chlorogenic acid號:905-99-7分子式:354.31

 柚皮甙二氫查爾酮英文名稱:Naringin two h chalcone號:18916-17-1分子式:582.55

 柚皮苷英文名稱:Naringin號:10236-47-2分子式:580.53458

 柚皮素英文名稱:Naringenin號:480-41-1分子式:272.25278

 羽扇豆醇英文名稱:Lupeol號:545-47-1分子式:426.7174

 鳶尾苷元磺酸鈉英文名稱:Tectorigenin sodium sulfonate號:548-77-6分子式:300.26

原花青素英文名稱:Primary anthocyanin號:4852-22-6分子式:594.529

 α-香附酮英文名稱:A-cyperone號:473-08-5分子式:218.33458


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