豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
Angiopoietin-1英文名稱:血管生成素-1抗體
Annexin V英文名稱:膜粘連蛋白5抗體
Annexin V英文名稱:重組膜粘連蛋白5抗體
alpha Adaptin英文名稱:銜接蛋白α-Adaptin抗體
APAF1(CT)英文名稱:凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)
APAF1(NT)英文名稱:凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)
ABCG2英文名稱:三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體
APOE英文名稱:載脂蛋白E抗體
Amyloid Precursor Protein英文名稱:淀粉樣肽前體蛋白抗體
Aquaporin 2英文名稱:水通道蛋白-2抗體
AGT英文名稱:血管緊張素原抗體
Androgen receptor英文名稱:雄激素受體抗體
AVEN英文名稱:細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑)
Axin1英文名稱:軸蛋白1抗體
ATG9B英文名稱:自噬相關(guān)蛋白9B抗體
Apg12英文名稱:自噬相關(guān)蛋白12抗體
ATG13英文名稱:自噬相關(guān)蛋白13抗體
ATG3英文名稱:自噬相關(guān)蛋白3抗體
phospho-ATF2 (Ser490/498)英文名稱:磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757)英文名稱:磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體
ADAM18英文名稱:去整合素樣金屬蛋白酶18抗體
ATF6英文名稱:活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體
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