原代細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中，及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過(guò)程中，雜交瘤細(xì)胞、每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是*的實(shí)驗(yàn)操作。因?yàn)樵跊](méi)有建立一個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時(shí)候，細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中隨時(shí)可能因細(xì)胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，如果沒(méi)有原始細(xì)胞的凍存，則因?yàn)樯鲜龅囊馔舛肮ΡM棄。
培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無(wú)雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見(jiàn)呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長(zhǎng)，但時(shí)間長(zhǎng)之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差，
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤(pán)里也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤(pán)加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。
CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移，采用過(guò)氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過(guò)氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí)，使其蒸汽彌漫。待過(guò)氧乙酸的氣味消散后，再移入細(xì)胞。孵箱應(yīng)定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié)。
其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。
預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線(xiàn)菌素D或雙抗；但細(xì)胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或放線(xiàn)菌素D或雙抗都于事無(wú)補(bǔ)，建議舍棄該污染細(xì)胞。，將環(huán)境*消毒，如果所有細(xì)胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個(gè)別污染，可能是操作問(wèn)題，就要注意操作。
原代細(xì)胞注意事項(xiàng)     
  1.DMSO 不用高壓滅菌；DMEM不能高溫高壓滅菌，可以過(guò)濾除菌。
  2.DMSO要用新的，而且要避光保存。
  3.DMSO：含10%FBS的DMEM=1:9(體積比)。
TLC法鑒別    紅豆蔻    中藥對(duì)照藥材    121012-200502        1.0g
TLC法鑒別    麥冬    中藥對(duì)照藥材    121013-200506        1.0g
TLC法鑒別    兩面針    中藥對(duì)照藥材    121014-200302        1.0g
TLC法鑒別    訶子    中藥對(duì)照藥材    121015-200503        0.5g
TLC法鑒別    青蒿    中藥對(duì)照藥材    121016-200403        1.5g
TLC法鑒別    苦木    中藥對(duì)照藥材    121017-200503        0.5g
TLC法鑒別    苦玄參    中藥對(duì)照藥材    121018-200503        1.0g
TLC法鑒別    苦參    中藥對(duì)照藥材    121019-200505        1.0g
原代細(xì)胞