當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>公司動態(tài)>>ATCC細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化
ATCC細(xì)胞必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
具體操作
1.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
(1)將水浴鍋預(yù)熱至37℃。(使用燒杯盛裝37度水也可)
(2)用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面.
(3)在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。
2.取出凍存管
(1)根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
(2)從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。
3.迅速解凍
(1)迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
(2)約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
4.平衡離心
(將凍存管中的液體倒入離心管中,加入4ml培養(yǎng)基,離心——除去DMSO)用托盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min離心3min。
5.制備細(xì)胞懸液
(1)吸棄上清液。
(2)向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
6.ATCC細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
Triamterene 200mg 三氨喋啶標(biāo)準(zhǔn)品 396-01-0
Tributyl Citrate 500mg 檸檬酸三丁酯標(biāo)準(zhǔn)品 77-94-1
Tributyl Phosphine Oxide 25mg 三正丁基氧化磷標(biāo)準(zhǔn)品 814-29-9
Trichlormethiazide 200mg 三氯噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品 133-67-5
Triclosan 200mg 三氯生標(biāo)準(zhǔn)品 3380-34-5
Tridihexethyl Chloride 200mg 曲地氯銨標(biāo)準(zhǔn)品 4310-35-4
Trientine Hydrochloride 200mg 鹽酸三乙烯四胺標(biāo)準(zhǔn)品 38260-01-4
Triethyl Citrate 500mg 檸檬酸三乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 77-93-0
Trifluoperazine Hydrochloride 200mg 鹽酸三氟拉嗪標(biāo)準(zhǔn)品 440-17-5
Triflupromazine Hydrochloride 200mg 鹽酸三氟丙嗪標(biāo)準(zhǔn)品 1098-60-8
ATCC細(xì)胞
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