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人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5537LC實(shí)驗(yàn)方法
人類(lèi)成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN操作步驟
人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC培養(yǎng)
細(xì)胞名稱(chēng) 人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 早期報(bào)道中指出該細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),Ad5的1~4344位線性核苷酸整合入細(xì)胞染色體19q13.2。該細(xì)胞為人類(lèi)腺病毒載體擴(kuò)增的宿主??杀磉_(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。生物安全級(jí)別為2級(jí)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 新生牛血清,10%
傳代方法 1:2-1:4
傳代情況 P35
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D21S11:28,30.2;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;PentaD:9,10;PentaE:7,15;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19
同工酶 人B,NP,G9PG,MD,AST
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]說(shuō)明書(shū)復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿(mǎn),光澤度好,*,專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類(lèi)產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶(hù)!
胰島素樣生長(zhǎng)因子2受體(IGF-2R)ELISA試劑盒 ,英文名: IGF-2R ELISA Kit
胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 ,英文名: IGF-2 ELISA Kit
胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA結(jié)合蛋白2(IGF2BP2)ELISA試劑盒 ,英文名: IGF2BP2 ELISA Kit
胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 ,英文名: IGF-1 ELISA Kit
胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA試劑盒 ,英文名: IRS-2 ELISA Kit
胰島素受體底物1(IRS1)ELISA試劑盒 ,英文名: IRS1 ELISA Kit
胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 ,英文名: ISR-β ELISA Kit
胰島素受體α(INSRA)ELISA試劑盒 ,英文名: INSRA ELISA Kit
胰島素生長(zhǎng)因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)ELISA試劑盒 ,英文名: IGF-Ⅱ ELISA Kit
胰島素生長(zhǎng)因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)ELISA試劑盒 ,英文名: IGF-Ⅰ ELISA Kit
胰島素抗體(Anti-Ins)ELISA試劑盒 ,英文名: Anti-Ins ELISA Kit
胰島素降解酶(IDE)ELISA試劑盒 ,英文名: IDE ELISA Kit
胰島素(INS)ELISA試劑盒 ,英文名: INS ELISA Kit
胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒 ,英文名: IAPP ELISA Kit
胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 ,英文名: TAP ELISA Kit
長(zhǎng)春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Vinorelbine Ditartrate 酒石酸長(zhǎng)春瑞濱 125317-39-7 C53H66N4O20 ≥98%
長(zhǎng)春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Vinpocetine 長(zhǎng)春西丁 42971-09-5 C22H26N2O2 ≥98%
長(zhǎng)春花 Catharanthus roseus (L.)G.Do Vindesine 長(zhǎng)春地辛 53643-48-4 C43H55N5O7 ≥98%
長(zhǎng)春花 Catharanthus roseus (L.)G.Do Vindesine sulfate 硫酸長(zhǎng)春地辛 59917-39-4 C43H57N5O11S ≥98%
長(zhǎng)春花 Catharanthus roseus (L.)G. Don Catharanthine Sulfate 硫酸長(zhǎng)春質(zhì)堿 70674-90-7 C21H26N2O6S ≥98%
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]說(shuō)明書(shū)長(zhǎng)春花 Catharanthus roseus (L.) Don Cephalotaxlen 三尖杉?jí)A 24316-19-6 C18H21NO4 ≥98%
長(zhǎng)春花 Catharanthus roseus (L.) Don Perivine 派利文堿 2673-40-7 C20H22N2O3 ≥98%
長(zhǎng)苞冷杉Abies georgei Mearnsetin none 16805-10-0 C16H12O8 ≥95%
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