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人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205操作步驟

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更新時(shí)間:2017-05-16 21:41:31瀏覽次數(shù):157次

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人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

細(xì)胞名稱     人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205操作步驟
形態(tài)特性      上皮樣
生長(zhǎng)特性     貼壁生長(zhǎng);懸浮生長(zhǎng)
特征特性      該細(xì)胞系是1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的。 該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4~6周。角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性;產(chǎn)生CEA、IL10。 
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法      1:2~1:6傳代;2~3天換液1次。
傳代情況     C6
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)     培養(yǎng)法(-)
STR      Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:10;D16S539:12,13;D18S51:18;D19S433:13,14;D21S11:30.2,33.2;D2S1338:17,18;D3S1358:16;D5S818:10,13;D7S820:9,10;D8S1179:9,14;FGA:21,23;TH01:8,9;TPOX:11;vWA:15;
同工酶     
染色體      71~75
使用權(quán)限     A類
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
人再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白(REG1A)免疫試劑盒    Human REG1A ELISA Kit
人載脂蛋白L1(APOL1)免疫試劑盒    Human APOL1 ELISA kit
人載脂蛋白H(Apo-H)免疫試劑盒    Human Apo-H ELISA Kit
人載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒    Human Apo-E ELISA Kit
人載脂蛋白C3(Apo-C3)免疫試劑盒    Human Apo-C3 ELISA Kit
人載脂蛋白C2(Apo-C2)免疫試劑盒    Human Apo-C2 ELISA Kit
人載脂蛋白C1(APO-C1)免疫試劑盒    Human Apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit
人載脂蛋白B48(apo-B48)免疫試劑盒    Human Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit
人載脂蛋白B100(Apo-B100)免疫試劑盒    Human Apo-B100 ELISA Kit
人載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒    Human apo-A5 ELISA Kit
人載脂蛋白A4(Apo-A4)免疫試劑盒    Human Apo-A4 ELISA Kit
人載脂蛋白A2(apo-A2)免疫試劑盒    Human Apolipoprotein A2,apo-A2 ELISA Kit

神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒    ,英文名:    fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit
巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA試劑盒    ,英文名:    MCP-1/CCL2 ELISA Kit
活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒    ,英文名:    Activin-A ELISA Kit
核心蛋白聚糖(DCN)ELISA試劑盒    ,英文名:    DCN ELISA Kit
胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒    ,英文名:    Cys-C ELISA Kit
骨成型蛋白5(BMP-5)ELISA試劑盒    ,英文名:    BMP-5 ELISA Kit
肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)ELISA試劑盒    ,英文名:    c-MET/HGFR ELISA Kit
二肽基肽酶IV(DPP4/CD26)ELISA試劑盒    ,英文名:    DPP4/CD26 ELISA Kit
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205操作步驟二肽基肽酶4(DPP4/CD26)ELISA試劑盒    ,英文名:    DPP4/CD26 ELISA Kit
二肽基肽酶-4(DPP4)ELISA試劑盒    ,英文名:    DPP4 ELISA Kit
二肽基肽酶4(DPP4)ELISA試劑盒    ,英文名:    DPP4 ELISA Kit
凋亡相關(guān)因子(Fas/Apo-1/CD95)ELISA試劑盒    ,英文名:    Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit

   

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