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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H661操作步驟

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更新時(shí)間:2017-05-17 16:24:38瀏覽次數(shù):168次

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人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H661操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶
細(xì)胞名稱      人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H661操作步驟
形態(tài)特性       上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性      貼壁生長(zhǎng)
特征特性       該細(xì)胞1982年建系,源自一位患有大細(xì)胞肺癌的男性的胸腔積液。該細(xì)胞角蛋白、波形蛋白陽(yáng)性。 
培養(yǎng)條件       RPMI 1640 (w/o Hepes)  10% FBS
傳代方法       1:3~1:5傳代,每周換液2~3次
傳代情況      P46
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)      培養(yǎng)法(-)
STR       Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:12;D18S51:11;D19S433:13,14;D21S11:31,33.2;D2S1338:17;D3S1358:16;D5S818:11;D7S820:8,10;D8S1179:10;FGA:20;TH01:8;TPOX:8;vWA:17;
同工酶      
染色體       130~153
使用權(quán)限      A類
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H661操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H661操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
山羊脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)免疫試劑盒    Goat Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
山羊脂蛋白脂酶(LPL)免疫試劑盒    Goat Lipoprotein Lipase,LPL ELISA Kit
山羊孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒    Goat Progesterone,PROG ELISA Kit
山羊過(guò)氧化氫酶(CAT)免疫試劑盒    Goat Catalase,CAT ELISA kit
山羊骨形成蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒    Goat BMP-2 ELISA Kit
山羊骨堿性磷酸酶(BALP)免疫試劑盒    Goat Bone Alkaline Phosphatase,BALP ELISA Kit
山羊骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒    Goat Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit
山羊骨保護(hù)素(OPG)免疫試劑盒    Goat Osteoprotegerin,OPG ELISA KIT
山羊谷胱甘肽還原酶(GSR)免疫試劑盒    Goat glutathione reductase,GSR ELISA kit
山羊谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)免疫試劑盒    Goat Glutathione Peroxidase,GSH-PX ELISA kit
山羊孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒    Goat orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit
山羊睪酮(T)免疫試劑盒    Goat Testosterone ELISA Kit
山羊肝脂酶(HL)免疫試劑盒    Goat hepatic lipase,HL ELISA Kit

Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒    ,英文名:    CTX-Ⅰ ELISA Kit
Ⅰ型膠原C 端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒    ,英文名:    CTX-Ⅰ ELISA Kit
4-羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒    ,英文名:    HNE ELISA Kit
40S核糖體蛋白S19(RPS19)ELISA試劑盒    ,英文名:    RPS19 ELISA Kit
3氧代5α類固醇4脫氫酶2(SRD5A2)ELISA試劑盒    ,英文名:    SRD5A2 ELISA Kit
3型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P3)ELISA試劑盒    ,英文名:    S1P3 ELISA Kit
3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA試劑盒    ,英文名:    3-NT ELISA Kit
2 型次核苷酸脫氫酶(IMPDH)(IMPDH2)ELISA試劑盒    ,英文名:    IMPDH2 ELISA Kit
1型1-磷酸鞘氨醇受體(S1P1)ELISA試劑盒    ,英文名:    S1P1 ELISA Kit
17酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)ELISA試劑盒    ,英文名:    17-KS ELISA Kit
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H661操作步驟17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒    ,英文名:    17-KS ELISA Kit
17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒    ,英文名:    17-OHP ELISA Kit
17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒    ,英文名:    17-OHCS ELISA Kit
17-α-羥化酶(17-α-OH)ELISA試劑盒    ,英文名:    17-α-OH ELISA Kit

 

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