當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>> 人纖維肉瘤;HT-1080操作步驟
人B淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;BALL-1操作步驟
人低分化鼻咽癌細(xì)胞株;CNE2-S18培養(yǎng)
Imatinib耐藥的胃腸道間質(zhì)瘤細(xì)胞系;GIST-1210
細(xì)胞名稱 人纖維肉瘤;HT-1080操作步驟
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞含有活化的N-ras癌基因。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人纖維肉瘤;HT-1080操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
人纖維肉瘤;HT-1080操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
人混合系列蛋白激酶樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)免疫試劑盒 human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit
人混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉因子(MLR-Bf)免疫試劑盒 Human MLR-Bf ELISA Kit
人核黃素激酶(RFK)免疫試劑盒 Human RFK ELISA Kit
人和肽素(copeptin)免疫試劑盒 human copeptin ELISA kit
人漢坦病毒(HV)抗體(IgM)免疫試劑盒 Human HV IgM ELISA kit
人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)免疫試劑盒 Human Tie-2 ELISA Kit
人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)免疫試劑盒 Human Tie-1 ELISA Kit
人含SET域4(setd4)免疫試劑盒 human setd4 ELISA Kit
人含patatin樣磷脂酶域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)免疫試劑盒 Human PNPLA3/ADPN/C22orf20 ELISA kit
人過氧化脂質(zhì)(LPO)免疫試劑盒 Human lipid peroxide,LPO ELISA kit
人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)免疫試劑盒 Human PPAR-α ElISA Kit
癌易感蛋白1(BRCA1)ELISA試劑盒 ,英文名: BRCA1 ELISA Kit
癌抗雌激素藥物耐藥性基因1(BCAR1)ELISA試劑盒 ,英文名: BCAR1 ELISA Kit
乳鐵傳遞蛋白(LTF)ELISA試劑盒 ,英文名: LTF ELISA Kit
乳糖酶(LCT)ELISA試劑盒 ,英文名: LCT ELISA Kit
乳酸脫氫酶C(LDHC)ELISA試劑盒 ,英文名: LDHC ELISA Kit
乳酸脫氫酶B(LDHB)ELISA試劑盒 ,英文名: LDHB ELISA Kit
肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶2(CPT2)ELISA試劑盒 ,英文名: CPT2 ELISA Kit
肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1B(CPT1B)ELISA試劑盒 ,英文名: CPT1B ELISA Kit
人纖維肉瘤;HT-1080操作步驟肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)ELISA試劑盒 ,英文名: CPT1A ELISA Kit
肉毒堿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(CT2)ELISA試劑盒 ,英文名: CT2 ELISA Kit
肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CRAT)ELISA試劑盒 ,英文名: CRAT ELISA Kit
肉毒堿-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(CORT)ELISA試劑盒 ,英文名: CORT ELISA Kit
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