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小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI 164操作步驟

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更新時間:2017-05-21 10:15:33瀏覽次數(shù):151次

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小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI 164操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細(xì)胞名稱     小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI 164操作步驟
形態(tài)特性      成纖維細(xì)胞樣
生長特性     貼壁生長
特征特性      該細(xì)胞系源自3-甲基膽蒽誘導(dǎo)產(chǎn)生的BALB/c小鼠纖維肉瘤,由M. Rollinghoff and N.L. Warneri建立。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性。 
培養(yǎng)條件      RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法      1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況     C170
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測     陰性
STR     
同工酶     同工酶鑒定
染色體     
使用權(quán)限     A類
小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI 164操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI 164操作步驟復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶
豬腎素(Renin)ELISA Kit    Pig Renin ELISA Kit
豬神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA Kit    Pig Neuronal Nitric Oxide Synthase,nNOS ELISA Kit
豬神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA Kit    Pig Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit
豬神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA Kit    Pig glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit
豬色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit    Pig pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit
豬三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA Kit    Pig Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit
豬乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA Kit    Pig Lactoferrin,LF/LTF ELISA kit
豬乳酸脫氫酶(LDH)ELISA Kit    Pig lactate dehydrogenase,LDH ELISA Kit
豬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)ELISA Kit    Pig Heat shock 70 kDa protein 1A,HSPA1A ELISA kit

大鼠CD63分子(CD63)免疫試劑盒    Rat Cluster of Differentiation 63,CD63 ELISA Kit
大鼠CD4分子(CD4)免疫試劑盒    Rat cluster of differentiation 4,CD4 ELISA Kit
大鼠CD45分子(CD45)免疫試劑盒    Rat cluster of differentiation 45,CD45 ELISA Kit
大鼠CD44分子(CD44)免疫試劑盒    Rat cluster Of differentiation,CD44 ELISA Kit
大鼠CD34分子(CD34)免疫試劑盒    Rat cluster of differentiation 34,CD34 ELISA Kit
大鼠CD30分子(CD30)免疫試劑盒    Rat Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA Kit
大鼠CD19分子(CD19)免疫試劑盒    Rat cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit
大鼠CD117分子(CD117)免疫試劑盒    Rat CD117 ELISA Kit
大鼠CC趨化因子受體9(CCR9)免疫試劑盒    Rat CC-chemokine receptor 9,CCR9 ELISA Kit
小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI 164操作步驟大鼠C-C趨化因子6(CCL6)免疫試劑盒    Rat C-C motif chemokine 6,CCL6 ELISA kit
大鼠CCAAT增強子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)免疫試劑盒    Rat CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα ELISA Kit
大鼠B因子(BF)免疫試劑盒    Rat factor B,BF ELISA Kit
大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒    Rat B-cell CLL/lymphoma 2,BCL2 ELISA kit

 

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