當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>RNA/DNA提取>> 非凍型拭子DNA保存液
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:非凍型拭子DNA保存液
產(chǎn)品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號:CP100558
產(chǎn)品規(guī)格:詳見說明
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
巨細胞病毒單重熒光PCR檢測試劑盒485-Chlorothiophene-carboxylic acid2653
EB病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48Rivaroxaban3667892利伐沙班
單純皰疹/巨細胞病毒雙重熒光PCR檢測試劑盒48D-Tryptophan methyl ester 1477
手足口病EV-U/EV71型/CoxA16型病毒三重熒光PCR檢測試劑盒487-Methoxy-naphthaleneacetic acid68362
腮腺炎/乙腦/腸道病毒三重熒光PCR檢測試劑盒48Dehydrotolvaptan1379736
小鼠維生素C(VC)ELISAKit Thevebioside 114586-47-9 中文名: 分子式:C36H56O13
小鼠維生素B6(VB6)ELISAKit Loxoprofen 中文名:洛索洛芬 分子式:C15H18O3 度:98.0%
小鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒 Losartan 中文名:氯沙坦 分子式:C22H23ClN6O 度:98.0%
小鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒 Losartan 中文名:氯沙坦 分子式:C22H23ClN6O
小鼠網(wǎng)膜素elisa試劑盒 小鼠網(wǎng)膜素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠網(wǎng)膜素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠網(wǎng)膜素試劑盒、小鼠網(wǎng)膜素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Medetomidine 86347-15-1 中文名:鹽酸美托咪啶 分子式:C13H17ClN2
非凍型拭子DNA保存液對乙烯基愈瘡木酚 GC≥98% 20mg 小鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒 ,英文名: ANG ELISA Kit
磺胺對甲氧嘧啶 HPLC≥98% 100mg 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA檢測試劑盒Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 96T/48T
萘酚磺酸鉀 HPLC≥98% 20mg 人肌質(zhì)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶(ATP2A1)試劑盒 Human ATP2A1 ELISA Kit
磺胺異惡唑 HPLC≥98% 250mg RatCiatesyhase,CSELISAKit大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸環(huán)丙沙星 HPLC≥98% 20mg 10倍TBS濃縮緩沖溶液100毫升
高紫檀素 HPLC≥98% 5mg MouseClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
杠柳毒苷元 HPLC≥98% 20mg 小鼠血管生長素(ANG)ELISA 試劑盒
甘油三酯 GC≥98% 20mg Rat calcium / calmodulin depende protein kinase 2 (CAMK 2) ELISA Kit 大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA試劑盒
α酮戊二酸 HPLC≥98% 20mg HumanarylsulfataseA,ASAELISAKit 人芳基硫酸酯酶A(ASA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
D熒光素鉀鹽 98% 20mg AMPKELISA試劑盒魚0酸化腺苷酸活化蛋白激酶規(guī)格:96T/48T
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