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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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RIPA裂解液

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-08-02 09:51:40瀏覽次數(shù):84次

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RIPA裂解液客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

特點優(yōu)勢:
1.
特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.   
優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

產(chǎn)品名稱

RIPA裂解液

規(guī)格

詳見說明

貨號

CP100470

具有下列特點:
1.
即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2.
引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix
中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4.
提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。

PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴增。
其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93-94)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

人副流感病毒4型單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Lynestrenol526利奈孕醇

HCoV)通用單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Norethindrone682炔諾酮

SARS)單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Allylestrenol432-烯丙雌醇

HKU)單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Estradiol diproppionate1138二雌二醇

OC43)單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Estradiol-benzoate7-butyrate6428雌二醇-苯甲酸7-丁酸酯
心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3   英文名稱:   cardiac muscle anscription factor GATA3   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   GATA3  Androstenediol-3-acetate  1639-43-6  中文名:雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式:C21H32O3 

心肌轉(zhuǎn)錄因子 4(GATA4)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Nitrendipine  中文名:尼群地平  分子式:C18H20N2O6  度:98.0%

心肌營養(yǎng)素1   英文名稱:   Cardioophin-1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   CT-1  Nifuroxazide  中文名:硝呋酚  分子式:C12H9N3O5  度:98.0%

心肌營養(yǎng)素 -1(CT-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Antipyrine  中文名:安替比林  分子式:C11H12N2O  度:99.0%

心肌肌鈣蛋白1   英文名稱:   cardiac oponin 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   CTn1  Nifedipine  中文名:硝苯地平  分子式:C17H18N2O6  度:98.0%
RIPA
裂解液維生素B HPLC99% 20mg 人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒 Human GDNF ELISA KIT

維生素B HPLC99% 20mg RatAi-Thrombin,AT-ELISAKit大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

維生素B HPLC99% 20mg 組蛋白H3-K4化共沉淀分析試劑盒5

維生素B HPLC99% 20mg Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISA試劑盒小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

維生素B HPLC99% 20mg 小鼠乙酰輔酶A羧化酶α(ACACα)ELISA試劑盒 ,英文名: ACACα ELISA Kit

維生素C HPLC99% 20mg 兔子Ⅲ型膠原(Col)ELISA檢測試劑盒rabbitCollageype,ColELISAKIT 96T/48T

維生素D HPLC99% 20mg 犬骨橋素(OPN)試劑盒 Canine Osteopoin ELISA Kit

維生素D HPLC99% 20mg 英文名稱HumanFDPELISAKit人纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)規(guī)格:96T/48T

維生素E HPLC98% 20mg 化線粒體總RNA萃取試劑盒20

維生素K HPLC99% 20mg RatIerleukin16,IL-16ELISA試劑盒大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
熒光定量PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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