當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T對蝦桃拉病毒(TSV)定性RT-PCR法檢測試劑盒
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:對蝦桃拉病毒(TSV)定性RT-PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:RT-PCR法
貨號:CP100145
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
1037792-44-1 MBX-2982 5mg Radix et caulis acanthopanacis senticosi刺五加PCR鑒定試劑盒
103787-97-9 BM-131246 10mg Rhizoma chuanxiong川芎PCR鑒定試劑盒
103787-97-9 BM-131246 1mg Herba sedi垂盆草PCR鑒定試劑盒
103787-97-9 BM-131246 20mg Rhizoma chuanxiong川芎PCR鑒定試劑盒
103787-97-9 BM-131246 5mg Herba sedi垂盆草PCR鑒定試劑盒
原兒茶酸(標(biāo)準(zhǔn)品)3,4-Dihydroxybenzoic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 載玻片細胞TSH-BETA蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20 HumanMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAkit 人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
鹽酸戊乙奎(標(biāo)準(zhǔn)品)Penehyclidine 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 Mouse25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISA試劑盒人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-奎寧醇(標(biāo)準(zhǔn)品)3-quinuclidinol質(zhì)量規(guī)格:檢查用 小鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒 ,英文名: FAS ELISA Kit 組織總膽汁酸酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20
普伐他汀四甲基丁胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Pravastatin1,1,3,3-tetramethylbutylamine質(zhì)量規(guī)格:含量測定 牛1酸果糖激酶(PFK)ELISA檢測試劑盒BovinePhosphofructokinase,PFKELISAKit 96T/48T Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
對蝦桃拉病毒(TSV)定性RT-PCR法檢測試劑盒非洲綠猴腎細胞;GL-37脫水長春花堿二硫酸鹽Anhydro Vinblastine Disulfate Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CN3 Others Rat 大鼠 Coactin 3 / CN3 人細胞裂解液 (陽性對照) 替莫唑胺-d3Temozolomide-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL(S)賴諾普利-d5(S) Lisinopril-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進口
M14細胞,人色素瘤細胞 枯草芽孢桿菌色變種 人肺癌細胞;A-427 [A427](R)-賴諾普利鈉鹽(R)-Lisinopril Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標(biāo)簽)賴諾普利環(huán)己基類似物Lisinopril Cyclohexyl Analog質(zhì)量規(guī)格:美國進口
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
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