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結腸上皮細胞和腫瘤原代細胞說明

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產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-22 11:31:28瀏覽次數(shù):145次

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結腸上皮細胞和腫瘤原代細胞說明收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

人結腸MatchPair: 結腸上皮細胞和腫瘤原代細胞【Human Colon MatchPair: Normal Human Colonic Epithelial Cells and Colonic Carcinoma Cells產(chǎn)品描述:提供的細胞均來自新鮮組織,提供的細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。

保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的細胞,如是新鮮細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

產(chǎn)品名稱

結腸上皮細胞和腫瘤原代細胞說明

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-964409

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,375%CO2培養(yǎng)。
 犬胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Canine ypsin ELISA Kit  18607-90-4卡枯醇說明書  kakoul 

英文名稱MouseSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit小鼠5-羥色氨(5-HT)規(guī)格:96T/48T  58-55-9茶堿品牌  Theophylline

差異相減雜交試劑盒10  34271-54-0茶氨酸規(guī)格  Theanine

Ratfreefattyacids,FFAELISA試劑盒大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  30462-34-1茶黃素-3-沒食子酸酯廠家  Theaflavin-3-Gallate(TF-3-G) 

小鼠組蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC4 ELISA Kit  28543-07-9茶黃素-3#146;-沒食子酸酯說明書  Theaflavin-3#146;-Gallate  (TF-3#146;-G)
83-86-3植酸品牌   Phytic acid  組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20

83-67-0可可堿品牌  Theobromine  組織FGFR1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

83-49-8豬去氧膽酸廠家   Hyodeoxycholic acid  組織EPHA3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

83-48-7豆甾醇品牌  Stigmasterol   組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性檢測試劑盒20

83-46-5β-谷甾醇說明書  β-Sitosterol   組織D-乳酸比色法定量檢測試劑盒20
結腸上皮細胞和腫瘤原代細胞說明Ratglucoprotein130,gp130ELISA試劑盒大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  144506-14-9甘草查爾酮C廠家  Licochalcone C

小鼠轉錄激活因子3(ATF3)ELISA試劑盒 ,英文名: ATF3 ELISA Kit  1449-05-4甘草酸說明書  Glycyrrhetinic acid

犬促卵泡素(FSH)ELISA檢測試劑盒Caninefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T  551-15-5甘草苷品牌  Liquiritin

犬胸腺活化調節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)試劑盒 Canine thymus activation regulated chemokine,TARC/CCL17 ELISA Kit  578-86-9甘草素規(guī)格  Liquiritigenin

英文名稱HumanHLA-2ELISAKit人組織相容性抗原(HLA-2)規(guī)格:96T/48T  53956-04-0甘草酸單銨鹽廠家  Glycyrrhizic acid ammonium salt

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