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人前列腺上皮和腫瘤組織提取物說明

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-22 10:08:45瀏覽次數(shù):262次

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人前列腺上皮和腫瘤組織提取物說明收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2培養(yǎng)。

產(chǎn)品名稱

人前列腺上皮和腫瘤組織提取物說明

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-964371

人前列腺MatchPair: 前列腺上皮和腫瘤組織提取物【Prostate MatchPair: Normal Human Prostate Epithelial Derivatives and Prostate Tumor Derivatives】前列腺是不成對的實(shí)質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成,具有內(nèi)外分泌,控制排尿和運(yùn)輸功能。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體前列腺上皮組織和腫瘤組織中高質(zhì)量的總RNAPCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRBHIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mgRNA68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。

潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
110505-75-4  N6-(4-Hydroxybenzyl)adenosine  10mg  Torque Teno Sus Virus(TTSuV)豬托克特諾病毒(豬細(xì)環(huán)病毒)LAMP試劑盒 

110505-75-4  N6-(4-Hydroxybenzyl)adenosine  10mM*1mLinDMSO  Porcine Parvovirus(PPV)豬細(xì)小病毒LAMP試劑盒 

110505-75-4  N6-(4-Hydroxybenzyl)adenosine  50mg  Porcine Parvovirus(PPV)豬細(xì)小病毒LAMP試劑盒 

11050-94-5  Oligomycin B  10mg  Capripox Virus羊痘病毒LAMP試劑盒 

11050-94-5  Oligomycin B  1mg  Swine Vesicular Disease Virus(SVDV)豬水泡病病毒RT-LAMP試劑盒
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184苯并[g,h,i]芘(標(biāo)準(zhǔn)品)Benzo[ghi]perylene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品

BHK細(xì)胞,幼倉鼠腎細(xì)胞 胰腺癌細(xì)胞,CFPAC-1細(xì)胞 CM-R093大鼠胎兒成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL1-十八1(標(biāo)準(zhǔn)品)1-Octadecene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%(GC)

大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J辛胺(標(biāo)準(zhǔn)品)n-Octylamine質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%(GC)

RTN4R Others Human  RTN4R / NOGOR 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十八烷(標(biāo)準(zhǔn)品)Octadecane質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%(GC)

骨骼肌成肌細(xì)胞cDNAHSkMM cDNA2-辛酮(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Octanone質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%(GC)
人前列腺上皮和腫瘤組織提取物說明小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1丹酚酸C(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Salvianolic acid C

PTPN12 Others Human  PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丹酚酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Salvianolic acid D

腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cholesterol

散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21 成纖維細(xì)胞,Hs 578Bst細(xì)胞 HO-8910PM(高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞)膽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCholesterol

結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84丹蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定1,8-Dihydroxyanthraquinone

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