人成骨細(xì)胞【Human Bone: Normal Osteoblasts】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測試劑盒MouseovalbuminspecificIgE,OVAsIgE 96T/48T 7-羥基-4-甲基（標(biāo)準(zhǔn)品）  7-Hydroxy-4-methylcoumarin  質(zhì)量規(guī)格：≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 ，英文名： OVA sIgG ELISA Kit 7-羥基-4-甲基  7-Hydroxy-4-methylcoumarin  質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR

小鼠輪狀病毒(RV)抗原(Ag)ELISA試劑盒 ，英文名： Ag ELISA Kit 十一酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Testosterone undecanoate  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠絡(luò)絲蛋白(RL)ELISA試劑盒 ，英文名： RL ELISA Kit 雙嘧達(dá)莫（標(biāo)準(zhǔn)品）  Dipyridamole  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)ELISA試劑盒 ，英文名： ANKRD1 ELISA Kit 羧甲司坦（標(biāo)準(zhǔn)品）  S-Carboxymethyl-L-cysteine  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠酶(CA)ELISA試劑盒 ，英文名： CA ELISA Kit 硝酸異山梨酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Isosorbide dinitrate  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠酶(CAT)ELISA 試劑盒 48T/96T 試劑盒 組裝/原裝 月桂氮卓酮;氮酮  Laurocapram  質(zhì)量規(guī)格：>97%

小鼠酶(CAT)ELISA試劑盒 ，英文名： CAT ELISA Kit （標(biāo)準(zhǔn)品）  Oxymetazoline   質(zhì)量規(guī)格：含量測定

小鼠酶1(CA-1)ELISA試劑盒 ，英文名： CA-1 ELISA Kit 依他尼酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Ethacrynic acid  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用

小鼠酶1(PON1)ELISA試劑盒 ，英文名： PON1 ELISA Kit 鹽酸馬普替林（標(biāo)準(zhǔn)品）  Maprotiline   質(zhì)量規(guī)格：含量測定
RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit大鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T Ralpha羥基表藤黃酸 HPLC≥95% 20mg

3′端DNA生物素轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒10 Salpha羥基表藤黃酸 HPLC≥95% 20mg

Mousedopamine,DAELISA試劑盒小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羥基藤黃酸 HPLC≥95% 20mg

小鼠細(xì)胞色素C(CYCS)ELISA試劑盒 ，英文名： CYCS ELISA Kit 雷公藤新堿 HPLC≥95% 20mg

兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA檢測試劑盒Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T 衛(wèi)矛羰堿 HPLC≥95% 20mg

牛血清白蛋白(BSA)試劑盒 Bovine serum albumin,BSA ELISA kit 洋地黃蒽醌 HPLC≥95% 20mg

英文名稱HumanHRAbIgGELISAKit人抗心肌抗體IgG(HRAbIgG)規(guī)格：96T/48T O苯甲酰戈米辛O HPLC≥95% 20mg

等電聚焦蛋白電泳(IEF)強(qiáng)化補(bǔ)水緩沖液50毫升 黑蔓定堿 HPLC≥95% 20mg

RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T Triptonine B HPLC≥95% 20mg

小鼠細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA試劑盒 ，英文名： CYFRA21-1 ELISA Kit 雷公藤寧堿A HPLC≥95% 20mg
人成骨細(xì)胞價(jià)格RatCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙羥萘酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pamoic acid  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

Ratcross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙嘧達(dá)莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸  Dipyridamole Di-O-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

Ratcross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙嘧達(dá)莫單-O-β-D-葡萄糖苷酸  Dipyridamole Mono-O-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

RatcrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙嘧達(dá)莫-D20 (主要的)  Dipyridamole-D20 (Major)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

RatcrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙嘧達(dá)莫（標(biāo)準(zhǔn)品）  Dipyridamole  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

RatC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISAKit大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙嘧達(dá)莫  Dipyridamole  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP

RatC-telopeptideoftypeⅠcollagen,CTX-ⅠELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙(標(biāo)準(zhǔn)品)  Dichlorophene  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

RatC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit大鼠C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙氯芬酸酰胺  Diclofenac Amide  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

RatC-typenaiureticpeptide,CNPELISA試劑盒大鼠C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙氯芬酸鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）  Diclofenac   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 雙氯芬酸鈉  Diclofenac   質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。