您好, 歡迎來(lái)到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人呼吸道上皮細(xì)胞操作
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人呼吸道上皮細(xì)胞操作 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963708 |
人呼吸道上皮細(xì)胞【Human Airway: Normal Airway Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話(huà),瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RatGelsolinELISA試劑盒大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小構(gòu)樹(shù)醇A HPLC≥95% 20mg
Ratghcagons-likepepfide1,GLP-1大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 疏展香茶菜寧B HPLC≥95% 20mg
Ratghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISA試劑盒大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 延命草素 HPLC≥95% 20mg
Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-Ab大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,,三羥基',,氧基黃酮 HPLC≥95% 20mg
Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISA試劑盒大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 竹紅菌丙素 HPLC≥95% 20mg
Ratglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNF大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 顯軸買(mǎi)麻藤醇 HPLC≥95% 20mg
Ratglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISA試劑盒大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲基 O阿魏??崴狨?/span> HPLC≥95% 20mg
Ratglucocoicoid,GC大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲基 O阿魏酰奎尼酸酯 HPLC≥95% 20mg
Ratglucocoicoid,GCELISA試劑盒大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 槲皮素O蕓香糖苷 HPLC≥95% 20mg
Ratglucocoicoidreceptor,GR大鼠糖皮質(zhì)類(lèi)受體(GR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異直立角茴香堿 HPLC≥95% 20mg
英文名稱(chēng)Humanai-thrombieceptorELISAKit人抗凝血酶受體(A)規(guī)格:96T/48T 去甲漢黃芩素 HPLC≥95% 20mg
低分子蛋白標(biāo)準(zhǔn)樣100 補(bǔ)骨脂色烯查耳酮 HPLC≥95% 20mg
RatOsteopoin,OPNELISA試劑盒大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異補(bǔ)骨脂色烯查耳酮 HPLC≥95% 20mg
小鼠細(xì)胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)ELISA試劑盒 ,英文名: ARC ELISA Kit 異新補(bǔ)骨脂異黃酮 HPLC≥95% 20mg
兔抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitAi-endothelialcellaibodies,AECAELISAKit 96T/48T 羥基羽扇豆鹼 HPLC≥95% 20mg
牛雄(ASD)試劑盒 Bovine Androstenedione,ASD ELISA Kit 靈芝酸TR HPLC≥95% 20mg
英文名稱(chēng)HumanAT-IIIELISAKit人抗凝血酶(AT-III)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 靈芝烯酸A HPLC≥95% 20mg
低內(nèi)小量質(zhì)粒抽提試劑盒20/50 靈芝酸TQ HPLC≥95% 20mg
RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISA試劑盒大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 靈芝烯酸C HPLC≥95% 20mg
小鼠細(xì)胞分裂周期因子25(CDC25)ELISA試劑盒 ,英文名: CDC25 ELISA Kit Delta avenasterol HPLC≥95% 20mg
人呼吸道上皮細(xì)胞操作RatDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 疏展香茶菜寧B HPLC≥95% 20mg
RatdopamineD2receptor,D2RELISAKit大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 疏展香茶菜寧 A HPLC≥98% 5mg
RatdopamineD2receptor,D2RELISA試劑盒大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 舒尼替尼堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Sunitinib base 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit大鼠腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 舒尼替尼堿 Sunitinib base 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
RatEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISA試劑盒大鼠腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 舒尼替尼-d10 Sunitinib-d10 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 舒馬曲坦-d6琥珀酸鹽 Sumatriptan-d6 Succinate 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RatEndomeiumAibody,EMAbELISA試劑盒大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 舒馬曲坦-d6 Sumatriptan-d6 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
RatEndostatin,ESELISAKit大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 舒洛芬 Suprofen 質(zhì)量規(guī)格:>98%
RatEndostatin,ESELISA試劑盒大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 舒林酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulindac 質(zhì)量規(guī)格:檢查
RatEndotheliallipase,ELELISAKit大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 舒林酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulindac 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買(mǎi)風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。