實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系油菜RF2 PCR試劑盒
貨號:CP97228
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

以下是轉(zhuǎn)基因品系油菜RF2 PCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- DNASE1L3 antibody資源名稱土生隱球酵母(無性階段為土生假絲酵母種屬:Cryptococcus│humicolus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于生產(chǎn)賴氨酸培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:13生長條件:26℃

anti- DNASE2 antibody資源名稱魯酵母種屬:Saccharomyces│rouxii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:13生長條件:25-28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法

anti- DNASE2B antibody資源名稱西弗冠孢酵母種屬:Stephanaascus│ciferrii分離基物:人的口腔（mouth of Man）提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:436生長條件:25-28℃

anti- DNM2 antibody資源名稱嗜鞣質(zhì)菅囊酵母種屬:Pachysolen│tannophilus分離基物:單寧液（tanning liquor）提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:436生長條件:25-28℃

anti- DNM3 antibody資源名稱木拉克酵母種屬:Mrakia│sp.分離基物:哈密瓜提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:飼料用酶的篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:13

anti- DNMBP antibody資源名稱長柄鏈格孢（煙草赤星病菌）種屬:Alternaria│longipes提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:24-28℃

anti- DNMT1 antibody資源名稱磚紅鐮孢種屬:Fusarium│lateritium提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃

anti- DNMT2 antibody資源名稱變幻青霉種屬:Penicillium│variabile提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長條件:25-28℃存儲條件:真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法

anti- DNMT3A antibody資源名稱束狀刺盤孢（束狀炭疽菌）種屬:Colletotrichum│dematium分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:24-28℃

anti- DNMT3A antibody資源名稱拜賴青霉種屬:Penicillium│bilaiae提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃

anti- DNMT3L antibody資源名稱螺旋斯霉種屬:Backusella│circina分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃

anti- DNPEP antibody資源名稱巴恩真青霉種屬:Enpenicillium│baarnense分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃

anti- DNTT,TDT antibody資源名稱黃孢平革菌種屬:Phanerochaete│chrysosporium提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；定期移植法

anti- DNTT,TDT antibody資源名稱印度毛殼種屬:Chaetomium│indicum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:24℃

anti- DNTTIP1 antibody資源名稱日本曲霉種屬:Aspergillus│japonicus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃

anti- DOC2B antibody資源名稱尖鐮孢豌豆專化型（豌豆枯萎病菌）種屬:Fusarium│oxysporum f. sp. pisi提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:66生長條件:25-28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

anti- DOCK180 antibody資源名稱辣椒刺盤孢（辣椒炭疽病菌）種屬:Colletotrichum│capsici提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no

anti- DOCK180-Specific antibody資源名稱腐皮鐮孢種屬:Fusarium│solani提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃
轉(zhuǎn)基因品系油菜RF2 PCR試劑盒大鼠 AChRab Human C1QC(Complement C1q subcomponent subunit C) ELISA Kit46.9pg/ml78-5000pg/ml

大鼠 ACH Human SIRT4(NAD-dependent ADP-ribosyltransferase sirtuin-4) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 ALDH Human GDF11(Growth/differentiation factor 11) ELISA Kit9.375pg/ml15.625-1000pg/ml

大鼠 ADH Human FABP5(Fatty acid-binding protein, epidermal) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

大鼠 PL Human PFN2(Profilin-2) ELISA Kit0.375ng/ml0.625-40ng/ml

大鼠 GLP-2 Human NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit9.375pg/ml15.6-1000pg/ml

大鼠 GLP-1 Human NDN(Necdin) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml