實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系油菜ZSR502染料法qPCR試劑盒
貨號(hào):CP97244
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

以下是轉(zhuǎn)基因品系油菜ZSR502染料法qPCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- EML4 antibody資源名稱Fusarium verticillioides種屬:Fusarium│verticillioides分離基物:根提供形式:凍結(jié)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗金黃色葡萄球菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014

anti- ENC1 antibody資源名稱Massilia dura sp. nov.種屬:Massilia│dura sp. nov.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027

anti- ENDOG antibody資源名稱Massilia sp.種屬:Massilia│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:雙功能酶抑制劑培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027

anti- Endoglin/CD105 antibody資源名稱Stachybotrys chlorohalonata種屬:Stachybotrys│chlorohalonata分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生真菌毒素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014

anti- Endoglin/CD105 antibody資源名稱Ulocladium botrytis種屬:Ulocladium│botrytis分離基物:根提供形式:凍結(jié)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MEA生長(zhǎng)條件:25C

anti- Endostatin antibody資源名稱變鉛青鏈霉菌種屬:Streptomyces│lividans提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:遺傳工程宿主菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長(zhǎng)條件:28-30C

anti- Endothelin 1 antibody資源名稱大腸埃希氏菌DH5a/pEGFP-CEM15種屬:Escherichia│coli提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:保存Human APOBEC3G基因的基因工程細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0033生長(zhǎng)條件:37C

anti- ENO1 antibody資源名稱大腸埃希氏菌DH5α/T/gfp種屬:Escherichia│coli提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:保存表達(dá)GFP蛋白基因的基因工程細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0033生長(zhǎng)條件:37C

anti- ENO1 antibody資源名稱大腸埃希氏菌DH5α/T/linker-gfp種屬:Escherichia│coli提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:保存表達(dá)linker-GFP蛋白基因的基因工程細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0033生長(zhǎng)條件:37C

anti- ENO3 antibody資源名稱反卷毛殼種屬:Chaetomium│convolutum分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:26C

anti- ENO3 antibody資源名稱放射土壤桿菌種屬:Agrobacterium│radiobacter提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:與某些植物根部相互作用呈現(xiàn)聯(lián)合固氮作用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:28-30C

anti- ENOPH1 antibody資源名稱分枝桿菌屬菌種種屬:Mycobacterium│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抑制PaSecA酶活培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027

anti- ENOPH1 antibody資源名稱甘蔗鐮孢菌種屬:Fusarium│sacchari分離基物:三七根部土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:轉(zhuǎn)化三七總皂苷為CK、Mc、Mx培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0015

anti- E antibody資源名稱橄欖網(wǎng)狀鏈霉菌種屬:Streptomyces│olivoreticuli提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生Viomycin紫霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長(zhǎng)條件:28C

anti- ENOX2 antibody資源名稱旱地小單孢菌種屬:Micromonospora│chersina提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C

anti- ENPEP antibody資源名稱礪灰鏈霉菌康定變種種屬:Streptomyces│ostreogriseus var.kangdinensis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生Virginiamycin維基尼亞霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長(zhǎng)條件:28C

anti- ENPP4 antibody資源名稱綠黃馬杜拉放線菌福建新變種種屬:Actinomadura│viridoflava var. fujianensis nov. var.1991分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗真菌；抗白色念珠菌；抗新型隱球菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0038

anti- ENPP5 antibody資源名稱毛莖點(diǎn)霉屬菌種種屬:Chaetophoma│sp.分離基物:一品紅葉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用植物內(nèi)生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0138
轉(zhuǎn)基因品系油菜ZSR502染料法qPCR試劑盒大鼠 cTn-Ⅰ Human LPAR4(Lysophosphatidic acid receptor 4) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 AC-1 Human Smad1/MADH1(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 1) ELISA Kit0.469ng/ml0.781-50ng/ml

大鼠 ADORA2A Human Smad7/MADH7(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 ADORA1 Human TNFAIP6(Tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 ABCA1 Human AOC1(Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing]) ELISA Kit0.938ng/ml1.56-100ng/ml

大鼠 FL/K87-Ab Human MAOA(Amine oxidase [flavin-containing] A) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠adenovirus(ADV)antibody IgG Human CTXI(Cross Linked C-telopeptide of Type I Collagen) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml