實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系水稻LLRice62染料法qPCR試劑盒
貨號:CP97139
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

以下是轉(zhuǎn)基因品系水稻LLRice62染料法qPCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- C11orf70 antibody資源名稱類紅紅細(xì)菌種屬:Catellibacteriumchanglense=Rhodobacterchanglensis安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:109生長條件:30℃

anti- C11orf74 antibody資源名稱牙齦卟啉單胞菌種屬:Porphyromonas gingivalis分離基物:人類齦溝提供形式:凍干管，斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:，質(zhì)量控制菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:TSA+5%脫纖維羊血：胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g，大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g， 5.0g，瓊脂 15.0g，5%脫纖維羊血，pH7.3±0.2。121℃，15min。

anti- C11orf79 antibody資源名稱匣狀粘球菌種屬:pyxidicoccusfallax安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃

anti- C11orf83 antibody資源名稱孢囊桿菌種屬:CystobacterSP.安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃

anti- C12orf11 antibody資源名稱弱小珊瑚桿菌種屬:Corallococcusexiguous安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃

anti- C12orf54 antibody資源名稱黃色粘球菌種屬:Myxococcusxanthus安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃

anti- C12orf69 antibody資源名稱產(chǎn)堿假單胞菌種屬:Pseudomonasalcaligenes分離基物:游泳池水提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002;營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1.0L，pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mgMnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:30℃;好氧

anti- C13orf18 antibody資源名稱成團腸桿菌(成團泛菌)種屬:EnterobacteragglomeransEwingandFife安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃

anti- C13orf37 antibody資源名稱阪崎腸桿菌種屬:Enterobacter sakazakii提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 10.0 g，牛肉提取物 3.0 g，NaCl 5.0 g，瓊脂 15.0 g，蒸餾水 1.0 L，pH 7.0生長條件:37℃，好氧

anti- C14orf102 antibody資源名稱棉花立枯菌種屬:Rhizoctoniasolani安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法生長條件:25-28℃

anti- C14orf133 antibody資源名稱納地青霉種屬:Penicillium nalgiovense提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：20%馬鈴薯汁 1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g ，硫胺素 微量，瓊脂15g， pH 6生長條件:25-28℃

anti- C14orf138 antibody資源名稱香蕉枯萎病種屬:Fusariumoxysporum安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:4號生理小種培養(yǎng)方法生長條件:25-28℃

anti- C14orf156 antibody資源名稱蠟蚧輪枝孢菌種屬:Verticilliumlecanii安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17生長條件:25-28℃

anti- C14orf159 antibody資源名稱痢疾志賀氏菌種屬:Shigelladysenteriae提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:《GB4789.28培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》標(biāo)準(zhǔn)菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002;營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1.0L，pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mgMnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:35-37℃;好氧

anti- C14orf166 antibody資源名稱宋氏志賀氏菌種屬:Shigella sonnet提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂 ：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃，好氧

anti- C14orf2 antibody資源名稱普雷恩毛霉種屬:Mucor│prainii提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生產(chǎn)腐乳。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長條件:28-30℃

anti- C14orf28 antibody資源名稱立枯多核菌種屬:Rhizoctoniasolani安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植病菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長條件:24-28℃

anti- C14orf39 antibody資源名稱大腸桿菌種屬:Escherichia coli(Migula)CastellanietChulmers提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長條件:37℃，好氧
轉(zhuǎn)基因品系水稻LLRice62染料法qPCR試劑盒小鼠 sTLR9/sCD289 Human ATP5G3(ATP synthase lipid binding protein, mitochondrial) ELISA Kit9.4pg/ml15.6-1000pg/ml

小鼠 sTLR4 Human AR(Androgen receptor) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

小鼠 sTLR2 Human ANG(Angiogenin) ELISA Kit46.875pg/ml78.125-5000pg/ml

小鼠 ENG/sCD105 Human ANG1(Angiopoietin-1) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

小鼠 sCD86 Human ANG2(Angiopoietin-2) ELISA Kit28.125pg/ml46.875-3000pg/ml

小鼠 sCD40L Human ANGPTL4(Angiopoietin-related protein 4) ELISA Kit0.938ng/ml1.563-100ng/ml

小鼠 sCD30L Human AZU1(Azurocidin) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml