實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
參數規(guī)格：

產品名稱：轉基因品系番茄1345-4 PCR試劑盒
貨號:CP96988
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

以下是轉基因品系番茄1345-4 PCR試劑盒公司正在熱銷的產品：
Human PDHβ(Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit資源名稱禽腺病毒（7型）種屬:Aviadenovirus│Avian adenovirus 7分離基物:病料

Human PDI(Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit資源名稱禽腺病毒（12型）種屬:Aviadenovirus│Avian adenovirus 12分離基物:病料

Human PDIA2(Protein Disulfide Isomerase A2) ELISA Kit資源名稱傳染性法氏囊病病毒種屬:Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus分離基物:病雞

Human PDIA3(Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit資源名稱草魚出血病病毒種屬:Aquareovirus│Grass carp hemorrhage virus分離基物:病料

Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit資源名稱多殺性巴氏桿菌種屬:Pasteurella│multocida分離基物:病畜禽

Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit資源名稱蜜蜂鏈球菌種屬:Streptococcus│apis分離基物:病料

Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit資源名稱馬腺疫鏈球菌獸疫亞種種屬:Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus分離基物:病料

Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit資源名稱類馬鏈球菌種屬:Streptococcus│equisimilis分離基物:病料

Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit資源名稱鏈球菌(不定種)種屬:Streptococcus│sp.分離基物:病料

Human PF4V1(Platelet Factor 4 Variant 1) ELISA Kit資源名稱傳染性支氣管炎病毒種屬:Coronavirus│Infectious bronchitis virus分離基物:病雞

Human PFKM(Phosphofructokinase, Muscle) ELISA Kit資源名稱禽腦脊髓炎病毒種屬:Enterovirus│Avian encephalomyetitis virus分離基物:病雞

Human PFKP(Phosphofructokinase, Platelet) ELISA Kit資源名稱大腸埃希菌種屬:Escherichia│coli分離基物:病料

Human PGAM1(PhosphoglyceRate Mutase 1) ELISA Kit資源名稱牛瘟病毒種屬:Morbillivirus│Rinderpest virus分離基物:病牛

Human PGD2S(Prostaglandin D2 Synthase, Brain) ELISA Kit資源名稱兔出血癥病毒種屬:Lagovirus│Rabbit hemorrhagic disease virus分離基物:病兔

Human PGF2α(Prostaglandin F2α) ELISA Kit資源名稱單核細胞增生李斯特菌種屬:Listeria│monocytogenes分離基物:青貯料

Human PGRP-S(Peptidoglycan Recognition Protein-S) ELISA Kit資源名稱DH5α大腸桿菌克隆菌株種屬:DH5α Strain安全等級:1

Human PHB(Prohibitin) ELISA Kit資源名稱灰葡萄孢（斜面）種屬:Botrytis cinerea分離基物:草莓

Human PIK3Cβ(Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Beta Polypeptide) ELISA Kit資源名稱氧化亞鐵酸硫桿狀菌（不提供）種屬:Acidithiobacillus ferrooxidans分離基物:酸性的瀝青樣的煤炭礦流出物

Human PK(Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit資源名稱中間普氏菌種屬:Prevotella intermedia分離基物:膿胸

Human PK2(Prokineticin 2) ELISA Kit資源名稱特基拉芽孢桿菌種屬:Bacillus tequilensis分離基物:印染廢水；采集地│第二印染廠
轉基因品系番茄1345-4 PCR試劑盒paraspeckle component 1|Paraspeckle protein 1|PSP1|PSPC1形態(tài)特性  上皮細胞樣生長特性 貼壁生長特征特性  該細胞由武漢大學基礎醫(yī)學院提交保藏。HCCLM3細胞廣泛用于人肝癌發(fā)病機理的基礎和臨床研究，也可用于抗腫瘤藥物篩選。 培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS　

GLP1R(Glucagon-like peptide 1 receptor)|GLP-1 receptor|GLP-1R|GLP-1-R形態(tài)特性  上皮細胞樣生長特性 貼壁生長特征特性  該細胞由武漢大學生命科學學院吳建國教授提交保藏。RD細胞可用于人橫紋肌肉瘤的基礎研究和臨床研究。 培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS　

HTR1B|5-HT1B(5-hydroxytryptamine receptor 1B)|5HT1DB|HTR1D2|HTR1DB|S12|Serotonin 1D beta receptor|Serotonin receptor 1B|5-HT-1B|5-HT1DB|5-HT-1D-beta形態(tài)特性  淋巴母細胞樣生長特性 懸浮生長特征特性  該細胞由華中科技大學同濟醫(yī)學院免疫系龔非力教授交換保藏。Kasumi-1細胞且有人急性淋巴白血病細胞的典型特征，是研究人急性淋巴白血病的極材料。 培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS　

Lymphoid phosphatase|LYP|LYP1|LYP2|PEP|PTPN22|PTPN8形態(tài)特性  上皮細胞樣生長特性 貼壁生長特征特性  1971-1975年間，A. Leibovitz從結腸腺癌中分離建立十個細胞系，SW48為為其中之一。該細胞合成癌胚抗原，能在裸鼠中成瘤。 培養(yǎng)條件  L15: Leibovitz Medium  10%FBS　

HPTPZ|HPTPzeta|HTPZP2|phosphacan|PTP ZETA|PTP18|PTPRZ|PTPRZ1|PTPRZ2|PTPZ|R PTP zeta|R PTP zeta 2|RPTPB|RPTPbeta形態(tài)特性  淋巴母細胞樣生長特性 懸浮生長特征特性  HUT 78由A.F. Gazdar于1981年從一名53歲患有塞扎萊綜合癥的白人男性外周血中分離并建立。該細胞具有成熟T細胞的誘導－輔助特性。該細胞的表面能洗提出具有生物活性的IL-2。 培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS　

SAA4(Serum amyloid A-4 protein)|CSAA|C-SAA|Constitutively expressed serum amyloid A protein|SAA5|serum amyloid A4|constitutive形態(tài)特性  上皮細胞樣生長特性 貼壁生長特征特性  該細胞系源自一位患有橫紋肌肉瘤的1歲女孩的肌肉組織，由D.J. Giard建立。 培養(yǎng)條件  McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  10%FBS　

PTGES3(Prostaglandin E synthase 3)|p23|CPGES|TEBP|cPGES|Cytosolic prostaglandin E2 synthase|Hsp90 co-chaperone|Progesterone receptor complex p23|prostaglandin E synthase 3(cytosolic)|Telomerase-binding protein p23|unactive progesterone receptor|23 kD形態(tài)特性  成纖維細胞樣生長特性 貼壁生長特征特性  該細胞是一株人黑色素瘤細胞系?？捎糜诮游镅芯磕Ｐ汀?培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS　

Qprt|quinolinate phosphoribosyltransferase|NADC|QPRTase|nicotinate-nucleotide pyrophosphorylase [carboxylating]|nicotinate-nucleotide pyrophosphorylase (carboxylating)形態(tài)特性  成纖維細胞樣生長特性 貼壁生長特征特性  該細胞源于一位54歲女性黑色素瘤患者的皮膚組織，由Giard DJ建系。其染色體為超三倍體，帶有62條染色體。其中九條標志染色體普遍存在于A375細胞中，而普通染色體N2, N6和N22在細胞中只有一條。 培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS