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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞說(shuō)明
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞說(shuō)明 | T25m2 | CS-963719 |
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞【Human Colon: Normal Colonic Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒 ,英文名: VB6 ELISA Kit 胃饑餓素,人 Ghrelin (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素B9(VB9)ELISA試劑盒 ,英文名: VB9 ELISA Kit 生長(zhǎng)激素釋放因子,大鼠 GHRF, rat 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒 ,英文名: VC ELISA Kit 生長(zhǎng)激素釋放因子(1-44),人 GHRF (1-44), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒 ,英文名: VD ELISA Kit 生長(zhǎng)激素釋放因子-2 GHRP-2 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒 ,英文名: VD2 ELISA Kit 胰高血糖素樣肽-2(1-34),人 GLP-2 (1-34) (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素D3(VD3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 胰高血糖素(1-29),牛,人,豬 Glucagon (1 - 29), bovine,human, porcine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒 ,英文名: VD3 ELISA Kit 胰高血糖素(19-29),牛,人,豬 Glucagon (19 - 29), bovine,human, porcine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒 ,英文名: DBP ELISA Kit 胰高血糖素樣肽Ⅰ(7-36)酰胺,人 Glucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素D受體(VDR)ELISA試劑盒 ,英文名: VDR ELISA Kit 促性腺激素釋放激素相關(guān)蛋白(1-13),人 Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
小鼠維生素E(VE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 海沙瑞林 Hexarelin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA試劑盒小鼠(EPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蒿草酚A HPLC≥95% 20mg
小鼠胃動(dòng)素(MOT)ELISA試劑盒 ,英文名: MOT ELISA Kit 苦參醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISAKit 96T/48T 苦參醇K HPLC≥95% 20mg
人漢坦病毒(HV)抗體(IgM)試劑盒 Human HV IgM ELISA kit 雞屎藤苷 HPLC≥95% 20mg
Ratdopamineanspoer,DATELISAKit大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 澤瀉醇 A 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg
40%ACRYLAMIDE-BIS(37.5:1)溶液500毫升 澤瀉醇C HPLC≥95% 20mg
MouseEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISA試劑盒小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 澤瀉醇 E 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg
小鼠胃蛋白酶原C(PGC)ELISA試劑盒 ,英文名: PGC ELISA Kit 氧代澤瀉醇A HPLC≥95% 20mg
兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitneuophilelastase,NEELISAKit 96T/48T Trans咖啡酸 HPLC≥98% 20mg
牛維生素C(VC)試劑盒 Bovine vitamin C,VC ELISA Kit ,二羥基蒽醌 HPLC≥95% 20mg
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞說(shuō)明RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 圣草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Eriocitrin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA試劑盒大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 圣草苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Eriocitrin 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%(HPLC),分析標(biāo)準(zhǔn)品
RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 圣草苷 HPLC≥98% 20mg
RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISA試劑盒大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 生長(zhǎng)抑制素-28 Somatostatin-28 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
RatGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 生長(zhǎng)抑素 Somatostatin Acetate 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR,醋酸鹽形式
RatGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISA試劑盒大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 生長(zhǎng)激素釋放因子-2 GHRP-2 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Ratglycogensyhasekinase,GSKELISAKit大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 生長(zhǎng)激素釋放因子,大鼠 GHRF, rat 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Ratglycogensyhasekinase,GSKELISA試劑盒大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 生長(zhǎng)激素釋放因子(1-44),人 GHRF (1-44), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Ratgonadoopin-releasinghormone,GHELISAKit大鼠促性腺激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 生育酚乙酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Vitamin E acetate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
Ratgonadoopin-releasinghormone,GHELISA試劑盒大鼠促性腺激素釋放激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 生物素基妥布霉素酰胺 Biotinyl Tobramycin Amide 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
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