人支氣管平滑肌細(xì)胞【Human Lung: Bronchial Smooth Muscle Cells】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Mousesolubleclusterofdiffereiation30,sCD30ELISA試劑盒小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T ,'二氯二苯甲酮  HPLC≥98% 250mg

MouseSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISA試劑盒小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十六烯  GC≥99% 1ml

MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISA試劑盒小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 二苯硫醚 GC≥99% 1g

MouseSolubleEndoglin,ENG/sCD105ELISA試劑盒小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 二十五烷  GC≥99% 250mg

MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISA試劑盒小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 糖精  HPLC≥98% 250mg

Mousesolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISA試劑盒小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 二十三烷  GC≥99% 250mg

Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISA試劑盒小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 二十二烷  GC≥99% 1g

Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISA試劑盒小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 百菌清  HPLC≥98% 250mg

MouseSolubleprotein-100,S-100ELISA試劑盒小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 異丁香酚(正+反)  用于環(huán)境分析.HPLC≥98% 1ml

MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISA試劑盒小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 茚  用于環(huán)境分析,GC≥99% 250mg
RatParathyroidhormone,PTHELISA試劑盒大鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 去氧澤瀉醇B HPLC≥95% 20mg

小鼠胃泌素抑制肽(GIP)ELISA試劑盒 ，英文名： GIP ELISA Kit 脫水澤瀉醇F HPLC≥95% 20mg

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitmaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAkit 96T/48T 澤瀉醇O HPLC≥95% 20mg

牛細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)試劑盒 Bovine cytokeratin fragme aigen 21-1,CYFRA21-1 ELISA Kit 澤瀉醇 K 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg

英文名稱HumanMIP-2ELISAkit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白-2(MIP-2)規(guī)格：96T/48T 去乙酰澤瀉醇O HPLC≥95% 20mg

電鏡樣品固著液(2%Formalin固著液)50毫升 刻葉紫堇胺 HPLC≥95% 20mg

RatPeosidineELISA試劑盒大鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T ()二氫槲皮素 HPLC≥95% 20mg

小鼠胃泌素(GT)ELISA試劑盒 ，英文名： GT ELISA Kit 桑根酮K HPLC≥95% 20mg

兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit 96T/48T 環(huán)桑素 HPLC≥95% 20mg

牛維生素D(VD)試劑盒 Bovine Vitamin D,VD ELISA Kit ,二甲氧基,','三羥基黃酮 HPLC≥95% 20mg
人支氣管平滑肌細(xì)胞操作Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十六醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))  1-Hexadecanol  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

Ratgalanin,GALELISA試劑盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十九酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Methyl nonadecanoate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十九酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Nonadecanoic Acid  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC)

RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA試劑盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十九酸 GC≥98% 20mg

RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十二烯基丁二酸酐(>98%，BR)  DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous  質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA試劑盒大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十二烷基基氯化胺[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-DTMA-Cl  質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑

RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十二烷基基氯化銨（DTAC）(99%,離子對(duì)色譜級(jí))  Dodecyltrimethylammonium chloride  質(zhì)量規(guī)格：99%,離子對(duì)色譜級(jí)

RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA試劑盒大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十二烷基硫酸鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-SDS  質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑

RatGelsolinELISAKit大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十二烷基硫酸鈉(分子生物學(xué)級(jí))  SDS  質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)

RatGelsolinELISA試劑盒大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 十二烷基硫酸鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）   dodecyl sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。