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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞說明

人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞說明

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產(chǎn)品型號(hào)T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-06-19 19:25:10瀏覽次數(shù):115次

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人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞說明收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

收到凍存細(xì)胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞【Human Vascular : Normal Saphenous Vein Endothelial Cells產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

產(chǎn)品名稱

人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞說明

規(guī)格

T25m2

貨號(hào)

CS-963731

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4
.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng):
1.接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2培養(yǎng)。
 小鼠基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA試劑盒 ,英文名: HEXβ ELISA Kit 三氯蔗糖(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sucralose  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

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小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP1 ELISA Kit 桑色素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Morin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP-1 ELISA Kit 沙苑子苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)  Complanatoside A  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousemaixmetalloproteinase10,MMP-10 96T/48T 山梔苷甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Shanzhiside methylester  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP10 ELISA Kit 商陸皂苷甲(標(biāo)準(zhǔn)品)  Esculentoside A  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP-10 ELISA Kit 芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Alibiflorin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC96.50%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP12 ELISA Kit 蛇床子素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Osthole  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISA試劑盒小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 丹參螺縮酮內(nèi)酯,丹參隱螺內(nèi)酯 HPLC95% 20mg

小鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒 ,英文名: VB12 ELISA Kit 珠子草素 HPLC95% 20mg

小鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit 96T/48T 大子買麻藤乙素 HPLC95% 20mg

人果糖胺(FRA)試劑盒 Human fructosamin,FRA ELISA kit 葡萄素 HPLC95% 20mg

Rateosinophilcationicprotein,ECPELISAKit大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,'二羥基黃酮 HPLC98% 20mg

50Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升 龍血素C HPLC95% 20mg

MouseFcoagulationfactor,FELISA試劑盒小鼠凝血因子Ⅸ(F)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 狗牙花定堿 HPLC95% 20mg

小鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒 ,英文名: VA ELISA Kit ()荷包牡丹堿甲氯化物 HPLC98% 20mg

小鼠纖連蛋白(FN)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFibronectin,FNELISAKit 96T/48T O('E,'Z癸二烯?;?/span>)去氧巨大戟萜醇 HPLC95% 20mg

人廣州管園線蟲抗體(IgM)試劑盒 Human ai-angiosongylus caonensis aibody IgM ELISA Kit O('E,'Z癸二烯?;?/span>)O乙酰巨大戟二萜醇 HPLC95% 20mg
人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞說明RatIerleukin18,IL-18ELISA試劑盒大鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙利度胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  Thalidomide  質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定

RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙利度胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  Thalidomide   質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙卡林N-(2-醋酸異丙基酯)(吡羅昔康雜質(zhì) F)  Saccharin N-(2-Acetic Acid Isopropyl Ester)(Piroxicam Impurity F)  質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙格列汀/沙克列汀鹽酸鹽  Saxagliptin HCL  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

RatIerleukin1α,IL-1αELISAKit大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙格列汀/沙克列汀  Saxagliptin monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,單水合物

RatIerleukin1α,IL-1αELISA試劑盒大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙丁胺醇(標(biāo)準(zhǔn)品)  Salbutamol  質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定

RatIerleukin1β,IL-1βELISAKit大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙蟾毒精(標(biāo)準(zhǔn)品)  Arenobufagin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 沙蟾毒精 HPLC98% 20mg

RatIerleukin2,IL-2ELISAKit大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (標(biāo)準(zhǔn)品)    質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品

RatIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒大鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)  Aramite solution  質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%

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