當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2人前列腺上皮細胞操作
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人前列腺上皮細胞操作 | T25m2 | CS-963744 |
人前列腺上皮細胞【Human Prostate : Normal Prostate Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)NINHYDRIN蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒100 葡聚糖T 1g
Nitsch基礎培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 軟骨素硫酸鈉鹽 500mg
Nitsch*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 D纖維二糖 HPLC≥98% 100mg
N-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒6 千層紙素AβD葡萄糖醛酸苷 HPLC≥98% 5mg
NudemouseAlpha-fetoprotein,AFPELISA試劑盒裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 土霉素 HPLC≥98% 100mg
NudeMouseClaracellprotein,CC16ELISA試劑盒裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 吩噻嗪 GC≥98% 100mg
Nudemousecyclooxygenase-2,COX-2ELISA試劑盒裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 藏紅花酸二醛 HPLC≥98% 10mg
NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒裸鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 奧司他韋 HPLC≥98% 20mg
Oh固著液50毫升 阿夫兒茶精 HPLC≥98% 5mg
Oligo(dT)18(500納克/微升)100微升 阿福豆苷 HPLC≥98% 5mg
Chickennicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 野馬追內(nèi)酯K HPLC≥98% 20mg
載玻片細胞P27蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 梓甙 HPLC≥95% 20mg
Mousefractalkine/CX3CL1ELISAKit小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異紅花八角醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)ELISA試劑盒 ,英文名: AGE ELISA Kit 乙酰桉樹素 HPLC≥95% 20mg
兔子白介素9(IL-9)ELISA檢測試劑盒RabbitIerleukin9,IL-9ELISAKit 96T/48T 知母皂苷B HPLC≥98% 20mg
牛狀腺原氨酸(T3)試劑盒 Bovine i-iodothyronine,T3 ELISA Kit 丹參素 HPLC≥98% 20mg
英文名稱Humahyroid-PeroxidaseELISAKit人甲狀腺過氧化物酶(TPO)規(guī)格:96T/48T 原B HPLC≥98% 20mg
動物多核白細胞分離試劑盒10 原C HPLC≥98% 20mg
RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISA試劑盒大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蓮心堿高氯酸鹽 HPLC≥98% 20mg
小鼠外周鞘0脂蛋白22(PMP22)ELISA試劑盒 ,英文名: PMP22 ELISA Kit 脫氫芳樟醇 HPLC≥98% 20mg
人前列腺上皮細胞操作Ratlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISA試劑盒大鼠細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 噻奈普汀鈉鹽 Tianeptine salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Ratlymphotactin,Lptn/LTNELISAKit大鼠細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 噻螨酮標準溶液(10μg/ml,u=6%) Hexythiazox solution 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%
Ratlymphotactin,Lptn/LTNELISA試劑盒大鼠細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 噻螨酮標準溶液(100μg/ml,u=3%) Hexythiazox solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%
RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 噻螨酮(標準品) Hexythiazox 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5%
RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA試劑盒大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 噻呋酰胺(分析標準品,96%) Thifluzamide 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,96%
RatMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISAKit大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 噻蟲啉(標準品) Thiacloprid 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
RatMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 塞曲司特/西拉達司/塞拉司特 Seratrodast 質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 塞來昔布羧酸 Celecoxib Carboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 塞來昔布,塞內(nèi)昔布,賽利克西 Celecoxib 質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Ratmacrophageinflammatoryprotein1β,MIP-1βELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 塞來昔布,塞內(nèi)昔布(標準品) Celecoxib 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。