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人腎成纖維細胞【Human Renal : Normal Renal Fibroblasts】 產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人腎成纖維細胞直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963745 |
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA檢測試劑盒ChickenAcetoaceticacid,ACAC 96T/48T L(-)-二苯甲酰一水(>98%,BR) L-(-)DBTA, Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA檢測試劑盒Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3 96T/48T 乳糖酸(>98%,BC) Lactobionic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
雞主要組織相容性復(fù)合體(MHC/B)ELISA檢測試劑盒Chickenmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/B 96T/48T L-氨基酸氧化酶 L-Amino acid oxidase >4 U/mg 質(zhì)量規(guī)格:BC
雞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測試劑盒ChickenansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1 96T/48T L-氨基酸氧化酶 L-Amino acid oxidase >4 U/mg 質(zhì)量規(guī)格:BC
基因靶標技術(shù)試劑盒5 乙酸鑭五水(>99%,BR) Lanthanum (III) acetate, pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
基因化程度定量分析試劑盒20 L-刀豆氨酸硫酸鹽(>98%,BR) L-Canavanine sulfate salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
基因化程度定量分析試劑盒5 左旋肉堿鹽酸鹽(>98%,BR) L-Carnitine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
基因化分析20樣本 左旋肉堿鹽(>99%,BR) L-Carnitine L-tartrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
基因化檢測DNA修飾試劑盒20 化鉛(>98%,BR) Lead (II) iodide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
基因化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒60 硬脂酸鉛 Lead (II) stearate 質(zhì)量規(guī)格:BR
兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISA檢測試劑盒Rabbitsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 96T/48T Thunberginol C HPLC≥95% 20mg
牛軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)試劑盒 Bovine Cailage oligomeric maix protein,COMP ELISA kit (Z),開環(huán)甘遂(),,三烯,二酸 HPLC≥95% 20mg
英文名稱humaSIELISAKIT人甲狀腺刺激激素(TSI)規(guī)格:96T/48T 木蝴蝶苷A HPLC≥98% 20mg
動物二酚氧化酶(diphenolase)活性比色法定量檢測試劑盒20 羥基異亮氨酸 HPLC≥98% 20mg
RatPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA試劑盒大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 甲氧基喜樹堿 HPLC≥98% 20mg
小鼠外周蛋白(PRPH)ELISA試劑盒 ,英文名: PRPH ELISA Kit 異烏藥內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg
兔子D二聚體(D2D)ELISA檢測試劑盒RabbitD-Dimer,D2DELISAKit 96T/48T 靈芝酸DM HPLC≥95% 20mg
牛乳脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)試劑盒 Bovine milk fat globule-EGF factor 8 protein,MFGE8 ELISA Kit 紫樹甙 HPLC≥95% 20mg
英文名稱humanPTHELISAKIT人甲狀旁腺激素(PTH)規(guī)格:96T/48T 吲哚丙烯酸甲酯 HPLC≥95% 20mg
動物肺組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 石杉堿甲 HPLC≥99% 20mg
人腎成纖維細胞直銷Ratmacrophageinflammatoryprotein1β,MIP-1βELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 塞來西布 HPLC≥98% 20mg
Ratmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 塞克硝唑(標準品) Secnidazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
Ratmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 塞克硝唑 Secnidazole 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Ratmacrophageinflammatoryprotein3α,MIP-3αELISAKit大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 塞卡替尼 Saracatinib(AZD0530) 質(zhì)量規(guī)格:≥98.50%;Src抑制劑
Ratmacrophageinflammatoryprotein3α,MIP-3αELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞香素/祖師麻甲素(標準品) Daphnetin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAKit大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞香素 HPLC≥98% 20mg
Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞替加濱堿 Retigabine Base 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%
Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞替加濱 HPLC≥98% 20mg
Ratmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞替加濱 Retigabine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,
RatMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit大鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 瑞他帕林;瑞他莫林 Retapamulin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。