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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2小鼠肺動脈成纖維細胞操作

小鼠肺動脈成纖維細胞操作

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-19 20:16:40瀏覽次數(shù):124次

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小鼠肺動脈成纖維細胞操作如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠肺動脈成纖維細胞操作

T25m2

CS-963788

小鼠肺動脈成纖維細胞【Mouse Lung: Normal Artery Fibroblasts產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理:
1 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當(dāng)細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2  培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37,5%CO2  培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
英文名稱RatHaptoglobin大鼠結(jié)合珠蛋白(Hpt)規(guī)格:96T/48T 硝苯地平-d6  Nifedipine-d6  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHaptoglobin大鼠結(jié)合珠蛋白(Hpt)規(guī)格:96T/48T 脫氫硝苯地平  Dehydro Nifedipine  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHbA1c大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)規(guī)格:96T/48T 脫氫硝苯地平-d6  Dehydro Nifedipine-d6  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHbA1c大鼠糖化血紅蛋白(HbA1c)規(guī)格:96T/48T 羥基脫氫硝苯地平羧酸鹽  Hydroxydehydro Nifedipine Carboxylate  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHCG大鼠絨毛促性腺激素(HCG)規(guī)格:96T/48T 尼莫地平-d7  Nimodipine-d7  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHCG大鼠絨毛促性腺激素(HCG)規(guī)格:96T/48T 奧洛他定N氧化物  Olopatadine N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHCY大鼠同型半胱氨(HCY)規(guī)格:96T/48T 奧洛他定鹽酸鹽-d6  Olopatadine-d6   質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHeatShockProtein20大鼠熱休克蛋白20(HSP20)規(guī)格:96T/48T 外消旋去乙基奧昔布寧鹽酸鹽  rac Desethyl Oxybutynin   質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHeatShockProtein20大鼠熱休克蛋白20(HSP20)規(guī)格:96T/48T 奧昔布寧N氧化物  Oxybutynin N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

英文名稱RatHeatShockProtein40大鼠熱休克蛋白40(HSP40)規(guī)格:96T/48T (R)-N-去乙基奧昔布寧鹽酸鹽  (R)-N-Desethyl Oxybutynin   質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Raetinolbindingprotein4,RBP-4ELISA試劑盒大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 布洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ibuprofen  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒 ,英文名: A1c ELISA Kit 馬來酸依那普利  Enalapril Maleate  質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP

小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA檢測試劑盒MouseLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 96T/48T 馬來酸依那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)  Enalapril Maleate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

人骨成型蛋白7(BMP-7)試劑盒 Human BMP-7 ELISA Kit 氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶  5-Fluorouracil  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKit大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)  5-Fluorouracil  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

AKT蛋白共沉淀分析試劑盒5 琥珀酸舒馬曲普坦  Sumatriptan succinate   質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA試劑盒小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 琥珀酸舒馬曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sumatriptan succinate   質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 硫酸鏈霉素  Streptomycin Sulphate  質(zhì)量規(guī)格:>720IU/MG,BR

Rat cyclic guanosine monophosphate (cGMP) ELISA Kit 大鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 硫酸鏈霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Streptomycin Sulphate  質(zhì)量規(guī)格:效價測定

Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 硫酸雙氫鏈霉素  Dihydrostreptomycin Sulphate  質(zhì)量規(guī)格:EP/USP
小鼠肺動脈成纖維細胞操作Ricinuscommunisagglinin,RCAELISA試劑盒蓖麻凝集素(RCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基乙酸 HPLC98% 20mg

RIPA基礎(chǔ)裂解液不含有蛋白酶和0酸酶抑制劑 羥基伊曲康唑-d8  Hydroxy Itraconazole-d8  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

RIPA基礎(chǔ)裂解液不含有蛋白酶和0酸酶抑制劑 羥基氧化小檗堿 HPLC95% 20mg

RIPA*裂解液含有蛋白酶和0酸酶抑制劑 羥基羊毛甾(),二烯酸 HPLC98% 5mg

RIPA*裂解液含有蛋白酶和0酸酶抑制劑 羥基亞丹參醌 HPLC99% 20mg

RNasin(核糖核酸酶抑制劑)2500U 羥基 HPLC98% 20mg

RNA比色法定量檢測試劑盒20 羥基喜樹堿 HPLC98% 20mg

RNA比色法定量檢測試劑盒20 羥基豨薟精醇 HPLC98% 5mg

RNA電泳樣品處理液5毫升 羥基西立伐他汀鈉鹽  Hydroxy Cerivastatin  Salt  質(zhì)量規(guī)格:美國進口

RNA合成1樣本 羥基吳茱萸堿 HPLC98% 20mg

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