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注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠支氣管平滑肌細胞直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963793 |
小鼠支氣管平滑肌細胞【Mouse Airway: Normal Bronchial Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Mousedopamine,DAELISA試劑盒小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg
MouseDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒小鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基馬鞭草苷 HPLC≥98% 10mg
MouseE-Cadherin,E-CadELISA試劑盒小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥色胺鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg
MouseEmbryonicStemMESPU30,M30小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥色胺酸 HPLC≥98% 20mg
MouseEmbryonicStemMESPU30,M30ELISA試劑盒小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T OβD葡萄糖基龍膽苦苷 HPLC≥97% 20mg
MouseEndomeiumAibody,EMAbELISA試劑盒小鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ''阿魏酰斯皮諾素 HPLC≥98% 20mg
MouseEndotheliallipase,EL小鼠內皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T '丙二酸沙苑子苷單酯 HPLC≥98% 20mg
MouseEndotheliallipase,ELELISA試劑盒小鼠內皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 姜酚 HPLC≥98% 20mg
MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒小鼠內皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 姜烯酚 HPLC≥98% 20mg
MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISA試劑盒小鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,’二羥基’,’二甲氧基異黃烷OβD葡萄糖苷;’羥基 ’,’二甲氧基異黃烷OβD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg
豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒GuineapigEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 96T/48T 6-硫鳥嘌呤(進分) 6-TG/Thioguanine 質量規(guī)格:>98%,進分,Sigma A4882
牛0酸果糖激酶(PFK)試劑盒 Bovine Phosphofructokinase,PFK ELISA Kit 6-硫鳥嘌呤 6-TG/Thioguanine 質量規(guī)格:>98%,USP,BR
英文名稱HumaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit人核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格:96T/48T 6-硫鳥嘌呤(標準品) 6-TG/Thioguanine 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
動物糖蛋白麥芽凝集素(WGA)樹脂法化試劑盒5 維A酸;全反式維A酸;維生素A酸;視黃酸 All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin 質量規(guī)格:>98%%,USP,BR
RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISA試劑盒大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 維A酸;(標準品) All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin 質量規(guī)格:>98%,標準品
小鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒 ,英文名: CA-2 ELISA Kit 比卡魯胺 Bicalutamide 質量規(guī)格:>99%,BR
小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA檢測試劑盒MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAkit 96T/48T 比卡魯胺(標準品) Bicalutamide 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人骨成型蛋白15(BMP-15/GDF-9B)試劑盒 Human BMP-15 ELISA kit 白消安 Busulfan/Myleran 質量規(guī)格:>98.5%,USP,可用于細胞培養(yǎng)
RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 白消安(標準品) Busulfan/Myleran 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
ANDROGEECEPTOR蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 洛莫司汀 Lomustine 質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠支氣管平滑肌細胞直銷Sheepmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit綿羊主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基甲氧基鐵屎米酮 HPLC≥95% 20mg
Sheepmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA試劑盒綿羊主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基甲氧基蒽醌 HPLC≥95% 20mg
SheepPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基基;黃檀素 HPLC≥98% 20mg
SheepPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISA試劑盒綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基蒽醌 HPLC≥95% 20mg
Siated muscle actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )ELISA試劑盒 羥基吡喃酮 HPLC≥98% 5mg
SiRNA大量SperfusinX脂質體腹腔法動物轉染試劑盒5 羥基基伊曲康唑 Hydroxy Itraconazole 質量規(guī)格:美國進口
SiRNA大量SperfusinX脂質體靜脈法動物轉染試劑盒10 羥基積雪草酸(標準品) Madecassic acid 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
SiRNA大量SperfusinX脂質體局灶法動物轉染試劑盒5 羥基積雪草酸 HPLC≥98% 20mg
SiRNA大量SperfusinX脂質體細胞轉染試劑盒10 羥基積雪草酸 Madecassic acid 質量規(guī)格:HPLC≥80%,BR
SiRNA完整表達文庫構建技術試劑盒5 羥基積雪草苷(標準品) Madecassoside 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
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