我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

小鼠小腸平滑肌細(xì)胞【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)RatBone-specificAlkphaseB,ALP-B大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 降氧化北美黃連堿 HPLC≥98% 20mg

Ratbradykinin,BK大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羥基癸烯酸 HPLC≥98% 20mg

RatBrainderivedneuroophicfacor,BDNF大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 紫堇米定堿 HPLC≥98% 20mg

Ratbrain-gpeptides,BGP/Gehrelin大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 漏蘆甾酮 B HPLC≥98% 20mg

Ratbrainnaiureticpeptide,BNP大鼠腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 白頭翁素 HPLC≥98% 20mg

RatBromodeoxyuridine,BrdU大鼠脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 乙?；?/span>beta乳香酸 HPLC≥98% 20mg

Ratcalcineurin,CaN大鼠鈣調(diào)0酸酶(CaN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 滇藏五味子素G HPLC≥98% 20mg

RatCalcitonin,CT大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 龍牙楤木皂甙VII HPLC≥97% 20mg

Ratcalcitoningenerelatedpeptide,CGRP大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T Beta茄邊堿 HPLC≥98% 20mg

Ratcalcium/calmodulin-dependeproteinkinase-Ⅱ,CAMK2大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 栝樓萜二醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA檢測試劑盒MouseMacrophageInflammatoryProtein1β,MIP-1βELISAkit 96T/48T 環(huán)磷酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  Cyclophosphamide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

人谷胱甘肽還原酶(GR)試劑盒 Human Glathione Reductase,GR ELISA Kit 醋酸地塞米松  Dexamethasone Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 醋酸地塞米松（標(biāo)準(zhǔn)品）  Dexamethasone Acetate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

ANNEXINV-FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒10/20 甲氧芐啶  Trimethoprim  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 甲氧芐啶（標(biāo)準(zhǔn)品）  Trimethoprim  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒 ，英文名： PLGF ELISA Kit 西維來司鈉  Sivelestat    質(zhì)量規(guī)格：含量大于98.5%

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA檢測試劑盒MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISAkit 96T/48T 奈韋拉平  Nevirapine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP30,BR

人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)試劑盒 Human GSH-Px ELISA Kit 奈韋拉平（標(biāo)準(zhǔn)品）  Nevirapine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 磺胺甲惡唑  Sulfamethoxazole(SMZ)  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR

APATHY封片液10毫升 磺胺甲惡唑（標(biāo)準(zhǔn)品）  Sulfamethoxazole(SMZ)  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠小腸平滑肌細(xì)胞操作S腺苷同型半胱氨酸(SAH或AdoHcy)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20 羥基E賴百當(dāng)烯酸 HPLC≥95% 20mg

Tacrolimus (FK506) ELISA Kit 人他克莫司(FK506)ELISA試劑盒 羥基,脫氫醉椒素 HPLC≥95% 20mg

TAK1-TAB15微克 羥基,去氫柳杉酚 HPLC≥95% 20mg

tComplemefragme4a,C4aELISAKit大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羥基,二甲氧基紫檀烷；美迪紫檀素 HPLC≥98% 10mg

tComplemefragme4a,C4aELISA試劑盒大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羥基,二甲氧基黃烷酮 HPLC≥98% 20mg

TEM電鏡冰凍切片組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50 羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg

TEM電鏡冰凍切片組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒(含AP二抗)20 羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg

TEM電鏡冰凍切片組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測試劑盒(含一抗和AP二抗)10 羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg

TEM電鏡冰凍切片組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測試劑盒(含AP一抗)10 羥基,,羅漢松科三烯酸 HPLC≥98% 5mg

TEM電鏡冰凍切片組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50 羥基,,,四甲氧基山山酮 HPLC≥98% 10mg
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。