當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2小鼠小腸粘膜上皮細胞說明
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠小腸粘膜上皮細胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963799 |
小鼠小腸粘膜上皮細胞【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Mucosa Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 血竭黃烷A HPLC≥95% 20mg
Rathemeoxygenase1,HO-1大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基,脫氫醉椒素 HPLC≥95% 20mg
Rathemeoxygenase1,HO-1ELISA試劑盒大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新環(huán)桑色烯 HPLC≥95% 20mg
Rathemeoxygenase2,HO-2大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 伽升沃E HPLC≥95% 20mg
Rathemeoxygenase2,HO-2ELISA試劑盒大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基異補骨脂酚 HPLC≥95% 20mg
Rathepaticlipase,HL大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 前胡 A HPLC≥95% 20mg
Rathepaticlipase,HLELISA試劑盒大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 印度榅桲素 HPLC≥98% 20mg
Rathepatocytegrowthfactor,HGF大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 龍膽黃堿 HPLC≥95% 20mg
Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 五味子酯丙 HPLC≥95% 20mg
RatHexokinase,HK大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 戈米辛S HPLC≥95% 20mg
豚鼠端粒酶(TE)ELISA檢測試劑盒guineapigtelomerase,TEELISAKit 96T/48T 頭孢呋辛鈉 Cefuroxime 質量規(guī)格:>855ug/MG,USP30
??扇苄?/span>CD86(B7-2/sCD86)試劑盒 Bovine soluble Cluster of differeiation 86,sCD86 ELISA Kit 頭孢呋辛鈉(標準品) Cefuroxime 質量規(guī)格:效價測定
英文名稱HumanCrossLapsELISAKit人骨原交聯(lián)(CrossLaps)規(guī)格:96T/48T 頭孢曲松鈉 Ceftriaxone 質量規(guī)格:potency>980ug/mg,BR
動物糖蛋白酶解法非N非O糖基0脂酰肌醇(GPI)分解試劑盒20 頭孢曲松鈉(標準品) Ceftriaxone 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 頭孢他啶(含碳酸鈉) Ceftazidime with Carbonate 質量規(guī)格:94.0-105.0%,USP,BR
小鼠羧肽酶A3(CPA3)ELISA試劑盒 ,英文名: CPA3 ELISA Kit 頭孢唑啉鈉 Cefazolin 質量規(guī)格:>95%,BR
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒guineapigIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T 頭孢唑啉鈉(標準品) Cefazolin 質量規(guī)格:HPLC>95%,標準品
??扇苄?/span>CD8(sCD8)試劑盒 Bovine soluble cluster of differeiation 8,sCD8 ELISA Kit 哌拉西林鈉 Piperacillin 質量規(guī)格:>900μg//mg,USP,BR
英文名稱HumanBone-specificAlkphase-BELISAKit人骨特異性堿性0酸酶(ALP-B)規(guī)格:96T/48T 哌拉西林鈉(標準品) Piperacillin 質量規(guī)格:含量測定
動物糖蛋白酶解法*糖基分解試劑盒20 環(huán)吡司胺; 環(huán)吡酮胺 Ciclopirox Olamine 質量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養(yǎng)
小鼠小腸粘膜上皮細胞說明白三烯C4(LTC4)ELISA檢測試劑盒MonkeyLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit 96T/48T 茜素紅 Alizarin red 質量規(guī)格:AR
包蟲抗體IgG(間接法二步法) 茜素 HPLC≥98% 20mg
薄層色譜分析20樣本 茜素 Alizarin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
冰凍切片中性脂質蘇丹黑染色試劑盒50 前異菖蒲烯二醇 HPLC≥98% 5mg
冰凍切片中性脂質油紅O染色試劑盒50 前五味子素 B HPLC≥98% 5mg
冰凍切片總膽(酯酶法)菲律賓(FILIPIN)熒光染色試劑盒20 前腎上腺髓質素(45-92),人 Proadrenomedullin (45-92)(human) 質量規(guī)格:>95%,BR
冰凍切片總膽高氯酸萘醌(PAN)染色試劑盒50 前腎上腺髓質素(1-20),人 Proadrenomedullin (1-20)(human) 質量規(guī)格:>95%,BR
冰凍切片總膽舒爾茨染色試劑盒50 前列地爾,前列腺素E1 Alprostadil,PGE1, 質量規(guī)格:>95%,BR,USP30
冰凍切片總游離膽菲律賓(FILIPIN)熒光染色試劑盒50 前胡E HPLC≥95% 20mg
冰凍切片總脂酶活性格莫瑞(Gomori)染色試劑盒50 前胡 A HPLC≥95% 20mg
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產(chǎn)品前務必確認供應商資質及產(chǎn)品質量。