小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞【Mouse Aorta: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
pZERO載體克隆鑒定試劑盒20 千金藤堿 HPLC≥98% 5mg

pZERO載體克隆試劑盒(包括內(nèi)切酶)10 千里光非靈 HPLC≥98% 5mg

pZERO載體克隆試劑盒(不包括內(nèi)切酶)10 千年健醇 A HPLC≥98% 5mg

QuikFusin非脂質(zhì)體細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒10/100 前五味子素 B HPLC≥98% 5mg

Rabbit50%complemehemolysis,CH50ELISA試劑盒兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 前異菖蒲烯二醇 HPLC≥98% 5mg

Rabbit6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISA試劑盒兔6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 薔薇酸,'野鴉椿酸 HPLC≥98% 5mg

Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISA試劑盒兔8-異構(gòu)前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羥基大黃素 HPLC≥98% 5mg

Rabbitacetylcholine,ACHELISA試劑盒兔乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 秦艽甲素 HPLC≥98% 5mg

Rabbitacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 秦皮素啶 HPLC≥98% 5mg

rabbitadiponectin,ADPELISA試劑盒兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 球花苦苷 HPLC≥98% 5mg
MouseEndotheliallipase,ELELISAKit小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 鹽酸阿莫羅芬/鹽酸阿莫洛芬   Amorolfine   質(zhì)量規(guī)格：≥99,BR

小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： MPO-ANCA IgG ELISA Kit 鹽酸阿莫羅芬/鹽酸阿莫洛芬 （標(biāo)準(zhǔn)品）  Amorolfine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 96T/48T 氨芐西林鈉/氨芐青霉素鈉  Ampicillin   質(zhì)量規(guī)格：>900μg/mg, USP,BR

人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)抗體(IgG)試劑盒 Human GAD65 aibody IgG ELISA Kit 氨芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ampicillin   質(zhì)量規(guī)格：標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定

Ratglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 扁桃苷/苦杏仁苷  Amygdalin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

AP底物pNPP緩沖溶液100毫升 扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Amygdalin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISA試劑盒小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 阿尼芬凈  Anidulafungin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(MPO-ANCA)ELISA試劑盒 ，英文名： MPO-ANCA ELISA Kit 安絲菌素P-3（束絲放線菌）  Ansamitocin P-3  質(zhì)量規(guī)格：總含量>95% ,進(jìn)分

小鼠B因子(BF)ELISA檢測(cè)試劑盒MousefactorB,BFELISAKit 96T/48T 阿瑞吡坦;阿瑞匹坦  Aprepitant  質(zhì)量規(guī)格：>98%;NK1受體拮抗劑

人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)試劑盒 Human glamic acid decarboxylase 65,GAD65 ELISA Kit 泰諾福韋;替諾福韋  Tenofovir  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞價(jià)格冰凍切片組織RHO蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 七葉膽皂甙 HPLC≥98% 20mg

冰凍切片組織RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 七葉膽苷XVII(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gypenoside XVII  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

冰凍切片組織RyR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 七葉膽苷XVII HPLC≥98% 20mg

冰凍切片組織TNFALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 七氟烷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Sevoflurane  質(zhì)量規(guī)格：供GC法檢查用

冰凍切片組織TNFBETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)  Praseodymium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml

冰凍切片組織TSH-BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000µg/mL,基體：10%HCl)  Praseodymium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體：10%HCl

冰凍切片組織TUBULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 普瑞巴林（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pregabalin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

冰凍切片組織VEGF蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 普瑞巴林  Pregabalin  質(zhì)量規(guī)格：>99%,S構(gòu)型

冰凍切片組織αSMA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 普羅雌烯  Promestriene  質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR

冰凍切片組織βAMYLOID蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20 普羅布考（標(biāo)準(zhǔn)品）  Probucol  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。