我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

小鼠腎足突細(xì)胞【Mouse Kidney: Kidney Podocytes】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6R大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 培美曲塞二鈉  Pemetrexed Di  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,水合物

RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6RELISA試劑盒大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 培美曲塞二鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pemetrexed Di  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Ratsolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 酞磺胺噻唑  Phthalylsulfathiazole  質(zhì)量規(guī)格：>95%

RatSolubleprotein-100,S-100大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 匹格列酮  Pioglitazone base  質(zhì)量規(guī)格：>99%

RatSolubleprotein-100B,S-100B大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 匹格列酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pioglitazone base  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatsolubleP-selectin,sP-selectin大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 匹格列酮鹽酸鹽  Pioglitazone HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKL大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 匹格列酮鹽酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pioglitazone HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 苯噻啶蘋果酸鹽  Pizotifen Malate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 硫酸多粘菌素B  Polymyxin B Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>6500 IU/mg,USP30

Ratsolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAIL大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 硫酸多粘菌素B(標(biāo)準(zhǔn)品)  Polymyxin B Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
豚鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineaPig50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T 褪黑素,松果體素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Melatonine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

牛肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 Bovine Creatine Kinase MB Isoenzyme,CK-MB ELISA Kit 鹽酸米諾環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Minocycline   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

英文名稱HumanBonemorphogeneticprotein2ELISAKit人骨成型蛋白質(zhì)2(BMP-2)規(guī)格：96T/48T 鹽酸米托蒽醌(進(jìn)分)  Mitoxantrone HCl  質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分sigma M6545

動(dòng)物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測(cè)試劑盒10 鹽酸米托蒽醌  Mitoxantrone HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 鹽酸米托蒽醌（標(biāo)準(zhǔn)品）  Mitoxantrone HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)ELISA試劑盒 ，英文名： DAPK3 ELISA Kit 咪唑立賓  Mizoribine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

豚鼠球蛋白G(IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigImmunoglobulinG,IgGELISAKit 96T/48T 莫吉司坦  Moguisteine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

牛肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)試劑盒 Bovine Creatine Kinase BB Isoenzymes,CK-BB ELISA Kit 莫吉司坦(標(biāo)準(zhǔn)品)  Moguisteine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

英文名稱HumanOsteoprotegerinELISAKIT人骨保護(hù)素(OPG)規(guī)格：96T/48T 糠酸莫米松  Mometasone furoate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP31

動(dòng)物細(xì)胞/組織細(xì)胞色素C釋放凋亡檢測(cè)試劑盒10 糠酸莫米松(標(biāo)準(zhǔn)品)  Mometasone furoate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠腎足突細(xì)胞操作大量蛋白樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒5 派立辛 HPLC≥98% 20mg

大量蛋白樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒5 哌唑嗪-d8  Prazosin-d8  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大量蛋白樣品液相法去內(nèi)試劑盒5 哌唑嗪  Prazosin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大量蛋白樣品液相法去內(nèi)試劑盒5 哌立福新(KRX-0401)  Perifosine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,蛋白激酶B(Akt)信號(hào)通路阻斷劑

大量藍(lán)藻菌基因組DNA氯化銫萃取試劑盒5 哌拉西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Piperacillin    質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

大量全血基因組DNA化試劑盒(20毫升全血)10 哌拉西林鈉  Piperacillin    質(zhì)量規(guī)格：>900μg//mg,USP,BR

大量全血基因組DNA化試劑盒10 哌拉西林（標(biāo)準(zhǔn)品）  Piperacillin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測(cè)定

大量微藻菌基因組DNA萃取試劑盒(高多糖/酚)5 哌拉西林  Piperacillin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

大量腺病毒沉淀法化試劑盒1 帕唑帕尼鹽酸鹽  Pazopanib HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

大量腺病毒氯化銫化試劑盒5 帕唑帕尼  Pazopanib  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。