我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

小鼠肝成纖維細(xì)胞【Mouse Liver: Normal Liver Fibroblasts】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請(qǐng)及時(shí)電話(huà)或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶(hù)接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)山羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC/OLA)ELISA檢測(cè)試劑盒Goatmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/OLA 96T/48T 雪膽素甲（標(biāo)準(zhǔn)品）  cucurbitacins  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeyglialfibrillaryacidicprotein,GFAP 96T/48T 5-羥色胺酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  5-Hydroxytryptophan（5-HTP）  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeyadrenomedullin,ADM 96T/48T 5-羥色胺酸（5-HTP）  5-Hydroxytryptophan  質(zhì)量規(guī)格：>98%,混旋

石蠟切片軟骨組織染色試劑盒50 滅草煙,咪唑煙酸  Imazapyr acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%

調(diào)料D-葡萄糖酸內(nèi)脂比色法定量檢測(cè)試劑盒20 咪唑煙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Imazapyr acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

調(diào)料D-葡萄糖酸鹽比色法定量檢測(cè)試劑盒20 石膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Lithocholic Acid  質(zhì)量規(guī)格：>97(GC),標(biāo)準(zhǔn)品

調(diào)料D-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20 氧嗪酸鉀  Potassium Oxonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%

調(diào)料L-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20 氧嗪酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Potassium Oxonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

調(diào)料比色法定量檢測(cè)試劑盒20 異丁司特  Ibudilast  質(zhì)量規(guī)格：>98%

調(diào)料谷氨酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20 異丁司特(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ibudilast  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
人甘露糖受體(MR)試劑盒 Human mannose receptor,MR ELISA Kit 羅氟司特  Roflumilast  質(zhì)量規(guī)格：含量≥99.0%(HPLC)

RatImmunoglobulinM,IgMELISAKit大鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羅氟司特(標(biāo)準(zhǔn)品)  Roflumilast  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20 5'-三腺苷(ATP)  Adenosine triphosphate  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC),BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

MouseIerleukin-7,IL-7ELISA試劑盒小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 布林佐胺  Brinzolamide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP33,BR

小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)ELISA試劑盒 ，英文名： proNGF ELISA Kit 布林佐胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  Brinzolamide  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseangiopoietieceptoie1,ANG-R-Tie1ELISAkit 96T/48T 羅硝唑  Ronidazole  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

人甘露糖凝集素受體(MBLR)試劑盒 Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit 羅硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ronidazole  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 乙基纖維素  Ethyl cellulose  質(zhì)量規(guī)格：CP

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20 維生素 K1  Vitamin K1  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,油狀

MouseIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISA試劑盒小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 9-氨基米諾環(huán)素鹽酸鹽  9-Amino-minocycline HCl  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%（HPLC）
小鼠肝成纖維細(xì)胞操作大鼠腦紅蛋白(NGB)試劑盒 Rat Neuroglobin,NGB ELISA Kit 米諾地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)  Minoxidil  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 Rat brain naiuretic peptide,BNP ELISA Kit 米諾地爾  Minoxidil  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA檢測(cè)試劑盒RatBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit 96T/48T 米內(nèi)苷 HPLC≥98% 5mg

大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒 Rat Brain derived neuroophic facor,BDNF ELISA Kit 米那普侖鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)  Milnacipran  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠內(nèi)(ET)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratendotoxin,ETELISAKit 96T/48T 米那普侖鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg

大鼠內(nèi)(ET)試劑盒 Rat endotoxin,ET ELISA Kit 米那普侖鹽酸鹽   Milnacipran  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)試劑盒 Rat Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA Kit 米力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)  Milrinone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA檢測(cè)試劑盒ratEndothelin1,ET-1ELISAKit 96T/48T 米力農(nóng) HPLC≥98% 20mg

大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 Rat Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit 米拉貝隆  Mirabegron  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

大鼠內(nèi)皮素受體A(E-A)試劑盒 Rat endothelin receptor A,E-A ELISA Kit 米卡芬凈鈉  Micafungin   質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。