我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種，細(xì)胞庫管理規(guī)范，提供的細(xì)胞株背景清楚，提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞【Rat Lung: Normal Artery Fibroblasts】產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法：
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度，細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo)，請及時電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA檢測試劑盒Ratgalanin,GAL 96T/48T 馬賽替尼  Masitinib  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠肝脂酶(HL)ELISA檢測試劑盒Rathepaticlipase,HL 96T/48T 美西林/氮脒青霉素  Mecillinam  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA檢測試劑盒Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSH 96T/48T 甲羥孕酮/安宮黃體素  Medroxyprogesterone   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityThyroxine,u-T4 96T/48T 甲羥孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Medroxyprogesterone   質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠高敏狀腺原氨酸(u-T3)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3 96T/48T 甲巰咪唑/他巴唑/2-巰基-1-咪唑  Methimazole  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP 32

大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測試劑盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1 96T/48T 甲巰咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)  Methimazole  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠(T)ELISA檢測試劑盒RatTestoterone,T 96T/48T 美索巴莫  Methocarbamol  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP 32

大鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA檢測試劑盒RatLebtospiraIgG 96T/48T 美索巴莫（標(biāo)準(zhǔn)品）  Methocarbamol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA檢測試劑盒RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/N 96T/48T 潑尼松龍  Methylprednisolone  質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-Ab 96T/48T 潑尼松龍（標(biāo)準(zhǔn)品）  Methylprednisolone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97.5%,標(biāo)準(zhǔn)品
人干擾素活化基因205(Ifi205)試劑盒 human ierferon activated gene 205,Ifi205 ELISA Kit 羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6G  Rhodamine 6G  質(zhì)量規(guī)格：BS

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B   Sulforhodamine B  質(zhì)量規(guī)格：BS

C.guilliermondiiRFLP基因分析試劑盒20 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B   Sulforhodamine B  質(zhì)量規(guī)格：BS

MouseLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 氯化羅丹明110；羅丹明110  Rhodamine 110 chloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%

小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒 ，英文名： β-CG ELISA Kit 羅丹明123  Rhodamine 123  質(zhì)量規(guī)格：用于熒光標(biāo)記

小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA檢測試劑盒Mousesolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAkit 96T/48T 曲美布汀堿  Trimebutine base  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人干擾素調(diào)節(jié)因子8(IRF8)試劑盒 Human IRF8 ELISA Kit 6-羧基四羅丹明；6-TAMRA  6-Carboxytetramethylrhodamine  質(zhì)量規(guī)格：≥90%;for fluorescence

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 6-羧基四羅丹明琥珀酯,6-TAMRA, SE  6-TAMRA, SE   質(zhì)量規(guī)格：用于熒光標(biāo)記

C.kruseiRFLP基因分析試劑盒20 卵清蛋白；雞蛋白蛋白  Ovalbumin/Egg albumins  質(zhì)量規(guī)格：BR,80~90%

MouseLeptin,LEPELISA試劑盒小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 米替福新  Miltefosine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞直銷大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA檢測試劑盒Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit 96T/48T 沒食子?；鼘幩?/span> HPLC≥95% 20mg

大鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒 Rat prostate specific aigen,PSA ELISA Kit 沒食子?；鼘幩?/span> HPLC≥95% 20mg

大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA檢測試劑盒RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 96T/48T 沒食子酰基奎寧酸 HPLC≥95% 20mg

大鼠前心肽(Pro-ANP)試劑盒 Rat Pro Aial Naiuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit 沒食子酸月桂酯(>98.5%,BR)  Dodecyl gallate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

大鼠潛伏轉(zhuǎn)化生長因子結(jié)合蛋白1(LTBP1)試劑盒 Rat Late-ansforming growth factor beta-binding protein 1,LTBP1 ELISA kit 沒食子酸乙酯 HPLC≥98% 20mg

大鼠強(qiáng)啡肽(Dyn)試劑盒 Rat dynorphin,Dyn ELISA Kit 沒食子酸乙酯  Ethyl gallate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠羥戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA,HMG-CoA ELISA kit 沒食子酸一水物(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gallic acid monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠羥戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit 沒食子酸一水物  Gallic acid monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,AR

大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA檢測試劑盒Rathydroxyproline,HypELISAKit 96T/48T 沒食子酸辛酯 HPLC≥98% 20mg

大鼠羥脯氨酸(Hyp)試劑盒 Rat hydroxyproline,Hyp ELISA Kit 沒食子酸甲酯(>98%,BC)  Methyl gallate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。