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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞操作

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞操作

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產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-20 15:24:03瀏覽次數(shù):170次

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大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞操作如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞操作

T25m2

CS-963884

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞【Rat Vascular : Normal Saphenous Vein Endothelial Cells產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理:
1 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當(dāng)細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2  培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37,5%CO2  培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
人白介素4受體(IL4R/CD124)試劑盒 Human Ierleukin 4 receptor,IL4R/CD124 ELISA Kit 8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二鈉鹽水合物(>99.0%(HPLC)(T))  Di 8-Amino-1,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)(T)

人白介素5(IL-5)試劑盒 Human IL-5 ELISA KIT  102(>97.0%(HPLC)(N))  Coumarin 102  質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(N)

人白介素5受體alpha(IL5RA)試劑盒 Human IL5RA ELISA kit  314(>98.0%(HPLC)(N))  Coumarin 314  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)

人白介素6(IL-6)試劑盒 Human IL-6 ELISA KIT 氯化熒光素(>90.0%(HPLC))  Fluorescein Chloride   質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)

人白介素6受體(IL-6R)試劑盒 Human IL-6R ELISA Kit 2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))  2',7'-Dichlorofluorescein  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)

人白介素7(IL-7)試劑盒 Human IL-7 ELISA kit 2,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T))  2,3-Diaminonaphthalene  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)

人白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 Human Ierleukin 8 ELISA KIT 甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N))  Dimidium Bromide  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(N)

人白介素8(IL-8/CXCL8)自身抗體試劑盒 Human ierleukin 8 aoaibody ELISA Kit 7-(二氨基)-4-(>95.0%(GC)(T))  7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T)

人白介素增強子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)試劑盒 Human ILF2 ELISA kit 7-(二氨基)-4-三氟(>97.0%(GC)(T))  7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarin  質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)

人白三烯B4(LTB4)試劑盒 Human Leukoiene B4,LT-B4 ELISA Kit 7-(二乙基氨基)-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))  7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acid  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
小鼠趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL3L1 ELISA Kit 阿戈美拉?。?/span>II型)  Agomelatine  質(zhì)量規(guī)格:>99%,II晶型

豬白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒Porcineierleukin17,IL-17ELISAKit 96T/48T 阿戈美拉?。?/span>I型)  Agomelatine  質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,I晶型

大鼠壞死因子γ(TNF-γ)試劑盒 Rat tumor necrosis factor γ,TNF-γ ELISA Kit 吡拉西坦  Piracetam  質(zhì)量規(guī)格:>99%

英文名稱HumanAILR4ELISAKITAILR4規(guī)格:96T/48T 雷美替胺  Ramelteon  質(zhì)量規(guī)格:>98.5%

動物組織冰凍切片糖蛋白高酸希爾(PAS)法阿爾新藍(ALCIANBLUE)染色試劑盒50 拉科酰胺  Lacosamide  質(zhì)量規(guī)格:>98%

SheepIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 米那普侖鹽酸鹽   Milnacipran  質(zhì)量規(guī)格:>98%

小鼠趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒 ,英文名: CCL1 ELISA Kit 米那普侖鹽酸鹽(標準品)  Milnacipran  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC/SLA)ELISA檢測試劑盒swinemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/SLAELISAKit 96T/48T 丁苯那嗪  Tetrabenazine  質(zhì)量規(guī)格:>99%

大鼠壞死因子β(TNF-β)試劑盒 Rat Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA KIT 丁苯那嗪(標準品)  Tetrabenazine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

英文名稱HumanAILR3(h)ELISAKITAILR3規(guī)格:96T/48T 氨己烯酸  Vigabatrin  質(zhì)量規(guī)格:>99%
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞操作大鼠微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)試劑盒 Rat microtubule-associated protein 2,MAP-2 ELISA Kit 氯化血根堿  HPLC98% 20mg

大鼠微纖絲相關(guān)糖蛋白3(MFAP3)試劑盒 Rat Microfibril-associated glycoprotein 3,MFAP3 ELISA kit 氯化纈草素 HPLC98% 0.1mL

大鼠維生素A(VA)ELISA檢測試劑盒RatVitaminA,VAELISAKit 96T/48T 氯化天竺葵素O蕓香糖苷 HPLC95% 20mg

大鼠維生素A(VA)試劑盒 Rat Vitamin A,VA ELISA Kit 氯化天竺葵素,O雙葡萄糖苷 HPLC95% 20mg

大鼠維生素B12(VB12)ELISA檢測試劑盒RatVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T 氯化鍶六水  Strontium chloride, hexhydrate  質(zhì)量規(guī)格:AR,99%

大鼠維生素B12(VB12)試劑盒 Rat Vitamin B12,VB12 ELISA Kit 氯化鈰七水  Cerium (III) chloride, heptahydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99.9%

大鼠維生素B6(VB6)ELISA檢測試劑盒RatVitaminB6,VB6ELISAKit 96T/48T 氯化矢車菊素O槐糖苷 HPLC98% 20mg

大鼠維生素B6(VB6)試劑盒 Rat Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 氯化矢車菊素O阿拉伯糖苷 HPLC95% 20mg

大鼠維生素C(VC)ELISA檢測試劑盒RatVitaminC,VCELISAKit 96T/48T 氯化矢車菊素,(標準品)  Cyanidin Chloride  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

大鼠維生素C(VC)試劑盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit 氯化矢車菊素 HPLC98% 20mg

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