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我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠卵巢成纖維細胞說明 | T25m2 | CS-963903 |
大鼠卵巢成纖維細胞【Rat Ovary: Normal Ovarian Firbroblasts】產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)大鼠前列腺素E2合成酶(PGES)試劑盒 Rat prostaglandin E2 syhase,PGES ELISA Kit 替比夫定(標準品) telbivudine 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
大鼠前列腺素E代謝物(PGEM)試劑盒 Rat Prostaglandin E Metabolite,PGEM ELISA Kit 輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷 Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane 質量規(guī)格:含量≥99%(GC)
大鼠前列腺素F(PGF)ELISA檢測試劑盒ratProstaglandinF,PG-F 96T/48T 雷替曲塞 Raltitrexed 質量規(guī)格:≥99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
大鼠前列腺素F(PGF)試劑盒 Rat Prostaglandin F,PGF ELISA Kit L-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽 L-Ornithine L-aspartate salt 質量規(guī)格:>98%
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA檢測試劑盒RatProstaglandinF2α,PGF2α 96T/48T 雙嘧達莫 Dipyridamole 質量規(guī)格:>98%,USP
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)試劑盒 Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit 他米巴羅汀 Tamibarotene 質量規(guī)格:≥99.0%
大鼠前列腺素F2α受體(PTGFR)試劑盒 Rat Prostaglandin F2-alpha receptor,PTGFR ELISA kit 文多靈 Vindoline 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠前列腺素F合成酶(PGFS)試劑盒 Rat prostaglandin F syhase,PGFS ELISA Kit 羅丹明B;玫瑰紅B Rhodamine B 質量規(guī)格:BS
大鼠前列腺素H2(PGH2)試劑盒 Rat Prostaglandin H2,PGH2 ELISA Kit 頭孢哌酮;頭孢哌酮酸 Cefoperazone Acid 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA檢測試劑盒RatProstaticAcidPhosphatase,PAP 96T/48T 頭孢哌酮(標準品) Cefoperazone Acid 質量規(guī)格:含量測定
動物組織羥脯氨酸(HYP)比色法定量檢測試劑盒20 吉莫斯特;吉美嘧啶 Gimeracil 質量規(guī)格:>98%,二氫嘧啶脫氫酶(DPD)抑制劑
人高香草酸(HVA)ELISA試劑盒人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蝙蝠葛諾林堿(標準品) Daurinoline 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠前列腺素E合酶2(PTGES2)ELISA試劑盒 ,英文名: PTGES2 ELISA Kit 氯化木蘭花堿 Magnoflorine chloride 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA檢測試劑盒HumanGuanineExchangeFactor,GEFELISAKit 96T/48T 木蘭花堿 Magnoflorine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒 Rat lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit 化木蘭花堿 Magnoflorine iodide 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
英文名稱HumanCICPELISAKit人I型腺原蛋白C末端前肽(CICP)規(guī)格:96T/48T 去甲烏藥堿鹽酸鹽(標準品) Higenamine 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
動物組織氫/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 去甲烏藥堿鹽酸鹽 Higenamine 質量規(guī)格:>98%,BR
人神經營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒人神經營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 二氫歐山芹素 (標準品) Columbianetin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠前列腺素E2合成酶(PGES)ELISA試劑盒 ,英文名: PGES ELISA Kit 異澤蘭黃素(標準品) Eupatilin 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠巨噬細胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA檢測試劑盒Mousemacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 96T/48T 利莫那班羧酸 Rimonabant carboxylic acid 質量規(guī)格:>98%
大鼠卵巢成纖維細胞說明大鼠氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)試劑盒 Rat Peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA Kit 羅布麻寧;夾竹桃麻素(標準品) Acetovanillone 質量規(guī)格:GC>98%,標準品
大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit 羅布麻寧;夾竹桃麻素 Acetovanillone 質量規(guī)格:>98%,BR
大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA檢測試劑盒Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit 96T/48T 輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸 Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid 質量規(guī)格:>95%
大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒 Rat oxidized lowdensity lipoprotein aibody,OLAb ELISA Kit 輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷 Cyclen/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane 質量規(guī)格:含量≥99%(GC)
大鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)試劑盒 Rat oxidizided glathione,GSSG ELISA Kit 輪環(huán)藤寧 HPLC≥98% 20mg
大鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)抗體(IgG)試劑盒 Rat keyhole limpet hemocyanin(KLH)aibody(IgG)ELISA kit 輪環(huán)藤堿 HPLC≥98% 20mg
大鼠葉酸(FA)ELISA檢測試劑盒RatFolicacid,FAELISAKit 96T/48T 卵清蛋白;雞蛋白蛋白 Ovalbumin/Egg albumins 質量規(guī)格:BR,80~90%
大鼠葉酸(FA)試劑盒 Rat Folic acid,FA ELISA Kit 路路通酸(標準品) Liquidambaric acid 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
大鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA檢測試劑盒RatypsinELISAKit 96T/48T 路路通酸 HPLC≥98% 20mg
大鼠胰蛋白酶(ypsin)試劑盒 Rat ypsin ELISA Kit 路路通內酯(標準品) Liquidambaric lactone 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
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