大鼠淋巴成纖維細(xì)胞【Rat Lymphoid ：Normal Lymphoid Fibroblast Cells】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
MK人中期因子規(guī)格：48T/96T 路路通酸 HPLC≥98% 20mg

MPO人髓過氧化物酶規(guī)格：48T/96T 律草酮 HPLC≥98% 10mg

MTF人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白規(guī)格：48T/96T 綠原酸 HPLC≥98% 20mg

MTL人胃動素規(guī)格：48T/96T 氯化兩面針堿 HPLC≥98% 20mg

MT人褪黑素規(guī)格：48T/96T 氯化矢車菊素 HPLC≥98% 20mg

MUC5B人粘蛋白/粘液素5B規(guī)格：48T/96T 天竺葵素（氯化花葵素） HPLC≥98% 10mg

MUC5B人粘蛋白/粘液素5B規(guī)格：48T/96T 氯化纈草素 HPLC≥98% 0.1mL

NADPH人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸規(guī)格：48T/96T 輪環(huán)藤堿 HPLC≥98% 20mg

NAIP人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白規(guī)格：48T/96T 輪環(huán)藤寧 HPLC≥98% 20mg

NAP-2/CXCL7人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2規(guī)格：48T/96T 羅丹明B HPLC≥98% 20mg
人輔酶Q10(CoQ10)試劑盒 Human Coenzyme Q10,CoQ10 ELISA Kit 玉米黃質(zhì)  Zeaxanthin  質(zhì)量規(guī)格：>40%

RatIerleukin32,IL-32ELISAKit大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 三亞乙基硫代磷酰胺  Triethylenethiophosphoramide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CDK2蛋白共沉淀分析試劑盒5 普拉克索堿  Pramipexole Base  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%

Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅲ,MHC-Ⅲ/H-2ⅢELISA試劑盒小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 普拉克索堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pramipexole Base  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠前列腺素E2(PGE-2)ELISA試劑盒 ，英文名： PGE-2 ELISA Kit 染料木素/金雀異黃酮  Genistein  質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR

小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA檢測試劑盒Mousebasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit 96T/48T 染料木素/金雀異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品）  Genistein  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人脯氨酸肽酶(PEPD)試劑盒 Human PEPD ELISA Kit 木犀草素  Luteolin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%,BR

RatIerleukin4,IL-4ELISAKit大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 木犀草素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Luteolin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CDK3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 熊果酸  Ursolic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥85%,BR

Mousemalondialchehyche,MDAELISA試劑盒小鼠二(MDA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 熊果酸；烏蘇酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ursolic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠淋巴成纖維細(xì)胞操作大鼠胰蛋白酶原-1 試劑盒 Rat ypsinogen 1 ELISA Kit 路路通內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg

大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA檢測試劑盒Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 96T/48T 镥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10%HCl)  Lutetium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml in 10%HCl

大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)試劑盒 Rat ypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit 魯斯考皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ruscogenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠胰蛋白酶原酶(y)試劑盒 Rat ypsinogen,y ELISA Kit 魯斯考皂苷元 HPLC≥98% 20mg

大鼠胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒RatInsulin,INSELISAKit 96T/48T 魯米諾鈉(>98%,BS)  Luminol,  salt  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BS

大鼠胰島素(INS)試劑盒 Rat Insulin,INS ELISA Kit 魯米諾,發(fā)光氨  luminol  質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠胰島素降解酶(IDE)試劑盒 Rat Insulin-degrading Enzyme,IDE ELISA Kit 魯比替康; 9-硝基喜樹堿  Rubitecan  質(zhì)量規(guī)格：>99%

大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測試劑盒RatInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 96T/48T 蘆竹堿 HPLC≥98% 20mg

大鼠胰島素受體β(ISR-β)試劑盒 Rat Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT 蘆竹堿  Gramine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠胰島素受體底物1(IRS-1)試劑盒 Rat insulin receptor subsate-1,IRS-1 ELISA Kit 蘆薈新甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)  Aloeresin D  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。