當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞說明
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊);
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞【Rat Brain: Normal Nerve Microglia】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞說明 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | CS-963911 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
吊鐘海棠*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 DL-蘋果酸 DL-Malic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
頂體形態(tài)刀A凝集素熒光標記(ConA-FITC)染色試劑盒20 硫酸亞鐵七水(AR) Iron(II) sulfate, heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
頂體形態(tài)花生凝集素熒光標記(PNA-FITC)染色試劑盒20 三鉀 Potassium phosphate, tribasic 質(zhì)量規(guī)格:>98%
頂體形態(tài)豌豆凝集素熒光標記(PSA-FITC)染色試劑盒20 鈣黃綠素二鈉鹽 Calcein, salt 質(zhì)量規(guī)格:IND grade
動物扁桃腺組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 植酸鈉 Phytic acid dodeca salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
動物垂體組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10 菊粉;菊糖 Inulin from chicory 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
動物單酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量檢測試劑盒20 孔雀綠 Malachite green 質(zhì)量規(guī)格:IND grade
動物單核白細胞/細胞分離試劑盒10 聚乙二醇2000 PEG 2000 質(zhì)量規(guī)格:M.W:2000
動物多酚氧化酶(polyphenoloxidase;PPO)活性比色法定量檢測試劑盒20 硫代氨基脲(AR) Thiosemicarbazide 質(zhì)量規(guī)格:AR,>98%
動物多核白細胞分離試劑盒10 氯化亞鐵四水(AR) Iron (II) chloride, tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
小鼠前白蛋白(PA)ELISA試劑盒 ,英文名: PA ELISA Kit CAPE (咖啡酸苯乙酯) CAPE (Caffeic Acid Phenethylester) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠端粒酶(TE)ELISA檢測試劑盒Mousetelomerase,TEELISAKit 96T/48T 磺胺-5-甲氧嘧啶(98%) Sulfameter 質(zhì)量規(guī)格:>98%
人分泌型球蛋白A(SIgA)試劑盒 Human secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA Kit 雙甲脒(標準品) Amitraz 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標準品
RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 雙甲脒 Amitraz 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
CDK4蛋白共沉淀分析試劑盒5 檸檬酸一水 Citric acid monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
MouseMethemoglobin,MHBELISA試劑盒小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Salubrinal Salubrinal 質(zhì)量規(guī)格:>98%,eIF2α選擇性抑制劑
小鼠遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 伯安喹;伯氨喹 Primaquine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Rat tissue inhibitors of metalloproteinase 2 (TIMP-2) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒 D-熒光素,蟲熒光素 D-(-)-Luciferin 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%
HumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit 人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 麻保沙星;馬波沙星 Marbofloxacin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T MK0677,伊布莫侖甲磺酸鹽 Ibutamoren Mesylate,MK-0677 質(zhì)量規(guī)格:>98%,非肽類生長激素促分泌劑
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞說明大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA檢測試劑盒RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit 96T/48T 硫酸長春新堿/硫酸醛基長春堿 Vincristine Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng)
大鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)試劑盒 Rat Free i-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit 硫酸長春新堿 HPLC≥98% 20mg
大鼠游離原卟啉(FEP)試劑盒 Rat Free erythrocyte proloporphyrin,FEP ELISA Kit 硫酸長春堿(進分) Vinblastine Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:進分Sigma V1377
大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA檢測試劑盒Ratfreefattyacids,FFAELISAKit 96T/48T 硫酸長春堿(標準品) Vinblastine Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
大鼠游離脂肪酸(FFA)試劑盒 Rat free fatty acids,FFA ELISA Kit 硫酸長春堿 HPLC≥98% 20mg
大鼠誘導型合成酶(iNOS)ELISA檢測試劑盒Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT 96T/48T 硫酸長春堿 Vinblastine Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
大鼠誘導型合成酶(iNOS)試劑盒 Rat inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA KIT 硫酸長春地辛 Vindesine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
大鼠原激活的蛋白激酶1/MAP激酶1(MAPK1)試劑盒 Rat Mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1 ELISA kit 硫酸粘桿菌素,多粘菌素E硫酸鹽 Colistin Sulphate 質(zhì)量規(guī)格:≥19000IU/mg,EP6
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒RatProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T 硫酸粘桿菌素(標準品) Colistin Sulphate 質(zhì)量規(guī)格:效價測定
大鼠孕激素/孕酮(PROG)試劑盒 Rat Progesterone,PROG ELISA kit 硫酸茚地那韋 Indinavir sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>97%
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