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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>原代細(xì)胞>> T25m2大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞說(shuō)明
我公司提供原代細(xì)胞、細(xì)胞系、細(xì)胞株和菌種,細(xì)胞庫(kù)管理規(guī)范,提供的細(xì)胞株背景清楚,提供參考文獻(xiàn)和*培養(yǎng)條件。純度可達(dá) 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞說(shuō)明 | T25m2 | CS-963915 |
大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞【Rat Brain: Normal Nerve Astrocytes】產(chǎn)品描述:提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程,保證細(xì)胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮原代細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)小鼠酶2(CA-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousecarbonicanhydrase2,CA-2 96T/48T 鹽酸肼屈嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydralazine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒 ,英文名: CA-2 ELISA Kit 鹽酸羥嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Hydroxyzine di 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠酶2(PON2)ELISA試劑盒 ,英文名: PON2 ELISA Kit 金諾芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Auranofin 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠酶Ⅰ(CA1)ELISA試劑盒 ,英文名: CA1 ELISA Kit 硫酸特布他林(標(biāo)準(zhǔn)品) TERBUTALINE SULFATE 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠酶Ⅱ(CA2)ELISA試劑盒 ,英文名: CA2 ELISA Kit 麥芽三糖(標(biāo)準(zhǔn)品) MALTOTRIOSE 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
小鼠酶Ⅸ(CA9)ELISA試劑盒 ,英文名: CA9 ELISA Kit 鹽酸丙卡特羅(標(biāo)準(zhǔn)品) Procaterol HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠密封蛋白(OCLN)ELISA試劑盒 ,英文名: OCLN ELISA Kit 泛酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) D-pantothenate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
小鼠球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 尼達(dá)尼布;BIBF 1120 Nintedanib (BIBF1120) 質(zhì)量規(guī)格:三重血管激酶抑制劑
小鼠球蛋白A(IgA)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseImmunoglobulin,IgA 96T/48T 核黃素鈉混合物(標(biāo)準(zhǔn)品) Riboflavin-5-phosphate 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
小鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: IgA ELISA Kit 麥芽糖(標(biāo)準(zhǔn)品) D-(+)-Maltose monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CDK6蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25 核糖核酸酶 A 溶液 RNase A Solution 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級(jí),>60 U/mg,10 mg/ml
MouseMethylaseELISA試劑盒小鼠化酶(Methylase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T D-葡萄糖一水 D-Glucose, monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 ,英文名: GCK ELISA Kit 十二烷基硫酸鈉(分子生物學(xué)級(jí)) SDS 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 96T/48T 聚乙二醇6000 PEG 6000 質(zhì)量規(guī)格:分子量5,000~7,000,分子生物學(xué)級(jí)
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)試劑盒 Human SFRP4 ELISA Kit 吐溫20 Tween 20 質(zhì)量規(guī)格:CP
Ratisletcellaibody,ICAELISAKit大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 曲拉通X-100 Triton X-100 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)
CDK6蛋白共沉淀分析試劑盒5 胰蛋白胨 Tryptone 質(zhì)量規(guī)格:FMB Grade
Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA試劑盒小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 生物素;D-生物素;維生素 H 輔酶 R D-Biotin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA試劑盒 ,英文名: GUSβ ELISA Kit 甘油 Glycerol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
人維生素D(VD)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanVitaminD,VDELISAKit 96T/48T 檸檬酸鈉二水;檸檬酸三鈉二水 , tri salt, dehydrate 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,BR
大鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞說(shuō)明大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)試劑盒 Rat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit 硫酸鈰銨 Ammonium ceric sulfate 質(zhì)量規(guī)格:AR,>98%
大鼠脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)試劑盒 Rat Adipose iglyceride Lipase,ATGL ELISA Kit 硫酸沙丁胺醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Albuterol sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠脂肪酸合成酶(FAS)試劑盒 Rat fatty acid syhase,FAS ELISA kit 硫酸銫(分子生物學(xué)級(jí)) Cesium sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,分子生物學(xué)級(jí)
大鼠脂肪酸結(jié)合蛋白4,脂肪細(xì)胞型(FABP4)試劑盒 Rat fatty acid binding protein 4,adipocyte(FABP4)ELISA kit 硫酸軟骨素(標(biāo)準(zhǔn)品) Chondroitin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratadiponectin,ADPELISAKit 96T/48T 硫酸軟骨素 HPLC≥98% 20mg
大鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒 Rat adiponectin,ADP ELISA Kit 硫酸軟骨素 Chondroitin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)試劑盒 Rat Fatty acyl-CoA syhetase,ACS ELISA Kit 硫酸慶大霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Gentamicin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
大鼠脂氧素A4(LXA4)試劑盒 Rat Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit 硫酸慶大霉素 Gentamicin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>590IU/MG,BR
大鼠質(zhì)膜鈣ATP酶(PMCA)試劑盒 Rat Plasma membrane calcium-anspoing ATPase 2,PMCA Elisa kit 硫酸氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品) BERBERINE ACID SULFATE 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratneuophilelastase,NEELISAKit 96T/48T 硫酸氫氯吡格雷 I型 Clopidogrel Bisulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,I型
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
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