大鼠角膜成纖維細(xì)胞【Rat Eye: Normal Corneal Fibroblasts】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實驗要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT1 ELISA Kit 硫黃素 T(>75%,BS)  Thioflavin T  質(zhì)量規(guī)格：>75%,BS

小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測試劑盒MouseAngiopoietin2,ANG-2 96T/48T 硫藤黃素(>95%,BC)  Thiolutin from Streptomyces luteosporeus  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BC

小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-2 ELISA Kit 硫堇(>90%,BS)  Thionin  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS

小鼠血管生成素2(ANGPT2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT2 ELISA Kit 硫代水楊酸(>98%,BR)  Thiosalicylic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 硫鏈絲菌素  Thiostrepton from Streptomyces azureus  質(zhì)量規(guī)格：>90%,進(jìn)分

小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA檢測試劑盒MouseAngiopoietin4,ANG-4 96T/48T 吐啉(>90%,Ind Grade)  Thorin  質(zhì)量規(guī)格：>90%,Ind Grade

小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 ，英文名： ANG-4 ELISA Kit 胸腺嘧啶(>99%,BR)  Thymine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

小鼠血管生成素4(ANGPT4)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPT4 ELISA Kit 特泯菌  Timentin  質(zhì)量規(guī)格：BC

小鼠血管生成素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGⅡ ELISA Kit 草酸亞錫(>98%,BR)  Tin (II) oxalate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA檢測試劑盒Mouseangiopoietieceptoie1,ANG-R-Tie1 96T/48T 二氧化錫(> 99%,BR)  Tin (IV) oxide  質(zhì)量規(guī)格：> 99%,BR
Chymoypsin 可溶性淀粉  Starch soluble  質(zhì)量規(guī)格：BR

MouseMucin-7,MUC7ELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 醋酸鋰，二水(AR)  Lithium acetate dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

小鼠皮質(zhì)酮(CO)ELISA試劑盒 ，英文名： CO ELISA Kit 聚蔗糖400  Ficol 400  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人維生素B6(VB6)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminB6,VB6ELISAKit 96T/48T 二硝基水楊酸  3,5-Dinitrosalicylic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)試劑盒 Rat Mucin-1,MUC1 ELISA kit 丙二酸鈉   malonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%

英文名稱HumanFLT3ELISAKIT人FMS樣酪氨酸激酶3(FLT3)規(guī)格：96T/48T 二氫鈉二水   phosphate, monobasic, dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,分子生物學(xué)級

動物組織微粒體組分分離試劑盒50 丙二酸(AR)  Malonate  質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR

ELISAKitC3兔補(bǔ)體蛋白3規(guī)格：48T/96T 四水  Manganese (II) chloride, tetrahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%

小鼠皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA試劑盒 ，英文名： CBG ELISA Kit 干酪素  Casein  質(zhì)量規(guī)格：BR

人維生素C(VC)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminC,VCELISAKit 96T/48T 醫(yī)用凡士林  Vaseline  質(zhì)量規(guī)格：BR
大鼠角膜成纖維細(xì)胞直銷蛋白電泳尼羅紅染色試劑盒20 硫酸安普霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Apramycin sulfate  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

蛋白電泳伊紅黃色染色試劑盒10 硫酸阿米卡星,硫酸丁胺卡那霉素  Amikacin Sulfate   質(zhì)量規(guī)格：含量674-786ug /mg,USP30

蛋白定量樣品預(yù)處理試劑100 硫酸阿米卡星(標(biāo)準(zhǔn)品)  Amikacin Sulfate   質(zhì)量規(guī)格：效價測定

蛋白定量樣品預(yù)處理試劑100 硫酸阿巴卡韋  Abacavir Sulfate  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

蛋白定量樣品預(yù)處理試劑100 硫秋水仙苷 HPLC≥98% 20mg

蛋白活性穩(wěn)定液10毫升 硫普羅寧,N-(2-巰基丙酰)甘氨酸  Tiopronin  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

蛋白激酶譜系*分析技術(shù)試劑盒5 硫普羅寧（標(biāo)準(zhǔn)品）  Tiopronin  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

蛋白激酶系列高通量篩選熒光檢測試劑盒500 硫鏈絲菌素  Thiostrepton from Streptomyces azureus  質(zhì)量規(guī)格：>90%,進(jìn)分

蛋白酶/0酸酶*抑制混合液抑制蛋白破壞性生物酶活性 硫康唑  Sulconazole  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

蛋白酶抑制劑混合液保留細(xì)胞內(nèi)成分活性A、動物細(xì)胞B、細(xì)菌C、酵母菌D、植物 硫堇(>90%,BS)  Thionin  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS
注意事項：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。