產(chǎn)品名稱：蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲液)操作步驟
英文名字：Protease Inhibitor Cocktail

背景知識

內源蛋白的產(chǎn)生和降解一般都維持在一個平衡狀態(tài)，因此在穩(wěn)定的環(huán)境因素下細胞內的蛋白含量是也是穩(wěn)定的。但是在體外研究中，蛋白合成過程終止，而降解大大增強,從而影響蛋白得率。因此我們建議使用多種小分子組成的抑制劑混合物來抑制蛋白酶的功能，阻止蛋白降解情況的發(fā)生。
實驗方法

應用領域

蛋白純化，蛋白免疫印跡, 免疫(共)沉淀，蛋白質pull-down實驗，免疫熒光，免疫組織化學，激酶測定等。
使用方法

在室溫下溶解DMSO儲液， 在您的實驗體系中，按照1：100的比率(體積比體積)將抑制劑cocktail加入到樣品溶液中(比如細胞裂解液或者組織抽提物)。

蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲液)操作步驟常見問題：

問題1: 為什么要用蛋白酶抑制劑Cocktail？
回答1: 蛋白酶抑制劑Cocktail是低毒，全面的蛋白保護試劑，Z大限度地保護蛋白，使其免于被蛋白酶降解。目前生物學研究日漸深入，更多地將目標鎖定為細胞中較為微量的蛋白，如信號通路蛋白、受體蛋白，采用coIP,Pull-down等方法獲得樣品。對于這些微量的珍貴樣品，Cocktail能取得的保護效果，比單一的抑制劑（如PMSF）更為可靠。
問題2: 蛋白酶抑制劑Cocktail能否稀釋使用？
回答2: 蛋白酶活性抑制效果和很多因素有關，如目標蛋白降解的難易程度、蛋白酶的濃度、活性、抑制劑的濃度都會影響Z后的保護效果。我們的蛋白酶抑制劑Cocktail采用經(jīng)典濃度配比，確保對不同類型的蛋白酶都有充分的抑制效果。為了取得的保護效果，使用時應按照規(guī)定比例稀釋，這是此類產(chǎn)品的共性。但實際產(chǎn)品里，不同廠商的標示清楚程度不同，有些友商的對稀釋操作描述不嚴謹，很容易產(chǎn)生可以稀釋使用的誤導，需要仔細辨讀，以免影響實驗結果。在部分實驗室實際應用中，也存在對于已知蛋白的成熟操作流程中減量使用cocktail的情況，對于這類應用，Biotool可對照同類產(chǎn)品的相同比例稀釋使用，可以保證保護效果。
問題3: 實驗中經(jīng)常用PMSF來保護蛋白，蛋白酶抑制劑Cocktail和它比有什么優(yōu)勢？
回答3: PMSF是經(jīng)典的絲氨酸蛋白酶抑制劑，以前被廣泛應用于細胞裂解純化蛋白過程。但由于PMSF在很多方面存在明顯的缺點，逐步被保護效果更好，更安全的蛋白酶抑制劑Cocktail所取代。PMSF的毒性較高，因此在蛋白酶抑制劑中選用AEBSF作為其替代品。AEBSF的半致死量是2834mg/kg，而PMSF是200mg/kg，AEBSF安全域值超過PMSF十四倍多，同時有著相當?shù)囊种菩Ч瑢τ诤芏嘟z氨酸蛋白酶的抑制比PMSF更為迅速。PMSF的另一個缺點是易降解失效，它在水溶液中的半衰期是30min，在細胞裂解過程中很容易失效。而蛋白酶抑制劑Cocktail不但保護更加全面，而且效果更加持久。
問題4: 我應該選擇哪種類型的蛋白酶抑制劑cocktail， 片劑還是溶液？
回答4: 在選擇cocktail產(chǎn)品類型的時候我們需要注意一些細節(jié)問題。兩種類型的產(chǎn)品都含有添加物。片劑中含有若干種公司的未經(jīng)公開的醫(yī)藥成分， 而溶液型產(chǎn)品中含有溶劑成分DMSO。一般來說這些添加物是不會影響產(chǎn)品效果的。在工業(yè)生產(chǎn)中，溶液型產(chǎn)品較片劑來說需要的加工步驟少，因而質量好價格低。而片劑產(chǎn)品在儲存和運輸兩個環(huán)節(jié)具有優(yōu)勢，片劑能夠在4度儲存而不需要零下20度。我們推薦使用溶液型產(chǎn)品，價格更低，有效的抑制劑成分含量更高，便于直接分裝。
問題5: DMSO會不會對我的實驗造成影響？
回答5: DMSO會影響實驗結果的可能性很低。在生物科學領域DMSO被作為很多生物活性物質的溶劑，比如蛋白結晶和免疫共沉淀等要求較高的實驗體系中DMSO也有應用。DMSO在室溫下性質穩(wěn)定，在低溫條件下DMSO還是優(yōu)秀的細胞冷凍保護劑。
問題6: 用了Cocktail，結果仍然不好是怎么回事？
回答6: 蛋白酶抑制劑Cocktail作用是保護蛋白免受蛋白酶降解威脅，提高蛋白得率。對于絕大多數(shù)蛋白，Cocktail都有很好的效果。如果還是出現(xiàn)蛋白得率低的情況，需要謹慎檢查實驗步驟和方案設計，Z大限度發(fā)揮Cocktail作用，減少導致蛋白降解的環(huán)節(jié)。例如，細胞處理前，先要將裂解體系*準備好，預先加入Cocktail并混勻，將要破碎的細胞，收集完后或從冰箱中取出后立即加入準備好的裂解液中，給予蛋白全程保護。

蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲液)操作步驟儲存條件：
 大部分的試劑產(chǎn)品是比較穩(wěn)定的，只要您嚴格按照產(chǎn)品包裝或者說明書上的儲存條件進行儲存，*可以保證其在有效期內的正常使用。一般常見儲存條件有零下XX攝氏度，2-8攝氏度，常溫等。特別提醒，對于某些酶類制品，如果儲存條件是2-8攝氏度，不要儲存在零下，否則容易失活，對于某些需要嚴格避光，防潮，充氮氣保護的，接觸空氣或者過分暴露非常容易氧化或者受潮變質。
低溫儲存產(chǎn)品，運輸途中冷藏問題：
 對于需要低溫儲存的產(chǎn)品，我們在運輸時候都會采用冷藏包裝，但是部分由于外界氣溫過高，運輸時間較長，對于普通冷藏包裝，途中可能會溫度升高，這些都是沒有問題的，因為這種普通冷藏只適用于那些短期內（2周）高溫依然穩(wěn)定的產(chǎn)品，建議低溫的儲存條件，只是長期儲存時候的條件，您可以放心使用。對于某些特殊的產(chǎn)品，如抗體，我們會采用干冰冷藏包裝，確保全程低溫。公司都對產(chǎn)品性狀進行了嚴格的加速穩(wěn)定測試，行業(yè)經(jīng)驗豐富。
蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲液)操作步驟分裝及溶液配制：
 您收到貨物后不要自己進行分包，因為分包環(huán)境、包裝材料等因素可能導致分包后的產(chǎn)品變質；如您有特殊包裝要求，請在訂購時候與我們客服代表闡明，當然價格會做適當調整。對于開蓋后，長期未使用的，請務必重新密封好，建議Parafilm封口膜，并按照相應儲存條件使用。如果放置時間過長，超過產(chǎn)品有效期，建議您重新購買，以免影響實驗質量。
蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲液)操作步驟產(chǎn)品應用：
 對于一些相對特殊的產(chǎn)品，我們會提供產(chǎn)品說明書，里面會對產(chǎn)品溶解性，及我們所能了解的產(chǎn)品應用信息，實驗方案進行描述，您可以作為參考。對于常見試劑，因為應用廣泛，一般不提供說明書。如果您在實驗過程中遇到了問題，歡迎與我們討論，我們將盡力幫您解決。
蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲液)操作步驟儲存條件：避光、干燥陰涼處封閉貯存,嚴禁與有毒、有害物品混放、混運。本品為非危險 產(chǎn)品可按一般化學品運輸,輕搬動輕放,防止日曬、雨淋！受熱、受潮、受光后易喪失活力,保存期短,因此貯存和運輸條件比較苛刻。
therapeutic or diagnostic applications. 
產(chǎn)品介紹 The PAF receptor binds plaet-activating factor (PAF) and is thought to mediate its action via a G protein that activates a phosphatidylinositol-calcium second messenger system. PAF is a chemotactic phospholipid mediator that possesses potent inflammatory, smooth-muscle contractile and hypotensive activity. It has been implicated as a mediator in diverse pathologic processes, such as allergy, asthma, septic shock, arterial thrombosis, and inflammatory processes. 
The PAF receptor is induced by granulocyte macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), interleukin-5 and n-butyrate. A diverse range of compounds act as PAF receptor antagonists; these may be useful pharmacologically.
英文名稱  Anti-p58ipk/DNAJC3 
中文名稱  干擾素誘導蛋白p58ipk抗體 
別    名  DNAJC3; Protein Kinase Inhibitor P58; DnaJ homolog subfamily C member 3; HP58; Interferon induced, double stranded RNA activated protein kinase inhibitor; P58; p58 ipk ; P58IPK; PRKRI; Protein kinase inhibitor of 58 kDa; Protein kinase inhibitor p58. 
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg 
抗體來源  Rabbit  
克隆類型  polyclonal 
交叉反應  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
產(chǎn)品類型  一抗    

500g    瓶    Yeast Extract 酵母膏
100g    瓶    (YNB)無氨基酸酵母氮源(含硫酸銨)
        堿基與核酸
5g    瓶    Alloxan Momohydrate 四氧嘧啶
1g    瓶    6-Benzyl Aminopurine 6-芐基氨基喋呤
5g    瓶    6-Benzyl Aminopurine 6-芐基氨基喋呤
5g    瓶    Adenosine 腺苷
1g    瓶    ATPNa2 三磷酸腺苷二鈉
5g    瓶    ATPNa2 三磷酸腺苷二鈉
500mg    支    ADPNa2 二磷酸腺苷二鈉
1g    瓶    ADPNa2 二磷酸腺苷二鈉
1g    瓶    AMPNa2 一磷酸腺苷二鈉
5g    瓶    AMPNa2 一磷酸腺苷二鈉
蛋白酶抑制劑Cocktail(不含EDTA，100X DMSO儲液)操作步驟1vial    支    8-Azaguanine(原裝) 8－氮雜鳥嘌呤
5g    瓶    Adenine Sulfate 腺嘌呤硫酸鹽
10g    瓶    Adenine Sulfate 腺嘌呤硫酸鹽
5g    瓶    Adenine 腺嘌呤
10g    瓶    Adenine 腺嘌呤
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