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臺盼藍(lán)染色液 (0.4%)50ml實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:09:23瀏覽次數(shù):98次

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公司供應(yīng)的臺盼藍(lán)染色液 (0.4%)50ml實(shí)驗(yàn)方法品種類齊全,檢測效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

臺盼藍(lán)染色液 0.4%50ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
臺盼藍(lán)染色液 0.4%50ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
臺盼藍(lán)染色液 0.4%50ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
HCC827(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7

EFNB2 Others Canine Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

LOVE1細(xì)胞,結(jié)直腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,B16細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-29

人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701]

ARSA Others Human ARSA / Arylsulfatase A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0119HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IgG3 Others Mouse 小鼠 IgG3-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MC3T3-E1 Subclone 14小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 MC3T3-E1 Subclone 14 in mouse parietal bone cell sub clone 14 before a-MEM培養(yǎng)基+10%FBS

OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人單核細(xì)胞)
IL25 Others Rat 大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z

SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells

SK-N-SH細(xì)胞,人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人前列腺上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg

SF767(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HCT-15(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B
大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒 Human VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit

人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: PR3 Ab-IgG ELISA Kit

RatInterleukin32,IL-32ELISA試劑盒大鼠白介素32(IL-32)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanglutamicaciddecarboxylase,GADELISA試劑盒人*脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanIPO-38ELISAKitIPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 人髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒

Humancoagulationfactor,FELISAKit 人*Ⅲ(F)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanArachidonicAcid,AAELISA試劑盒人花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物游離吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測試劑盒(包括萃取)20

Humanthyroidhormoneautoantibodies,THAAELISAKit人甲狀腺非肽激素抗體(THAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
臺盼藍(lán)染色液 0.4%50ml實(shí)驗(yàn)方法兔乙酰*(ACh)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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