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更新時間:2017-07-06 09:11:02瀏覽次數(shù):117次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞膜染色試劑 Deep Red Dye 500ul實驗方法
福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
改良Harris*100ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
改良Harris*100ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
改良Harris*100ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
HEC-1-B(人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
恒河猴腎細胞;LLC-MK2
CDH2 Others Mouse 小鼠 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細胞裂解液 (陽性對照)
RKO-E6細胞,人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞,M619細胞 人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16
人臍帶間充質(zhì)干細胞RNAHUMSC miRNA5 μg
ALPL Others Human 人 ALPL / TNAP 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0042BxPC-3(人原位胰腺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
IgG Others Human 人 IgG1 Fc CHO細胞裂解液 (陽性對照)
抗霉菌溶液ABAMS
大額牛肺細胞;BFR-L1 中國倉鼠卵巢細胞,CHO細胞 Lncap(前列腺癌細胞)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM933
SERPINE1 Others Human 人 PAI-1 / SerpinE1 人細胞裂解液 (陽性對照)
IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Interferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照)
人表皮黑色素細胞-深色素cDNAHEM-d cDNA
小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)
Bel-7405細胞,人肝癌細胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細胞,PA317細胞 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
L6(大鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28013 Mesenchymal Stem CellOsteogenic Different. Medium, 間充質(zhì)干細胞成骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml
大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 ,英文名: sVCAM-1 ELISA Kit
人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA檢測試劑盒HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKIT 96T/48T
*檢測試劑盒 Biotin ELISA Kit
CLIAKitforOPG(MouseOsteoprotegerin)ELISAKIT小鼠骨保護素規(guī)格:48T/96T
糖化血紅蛋白(HbA1c)比色法定量檢測試劑盒50次
ELISAKitPOMC人阿黑皮素原規(guī)格:48T/96T
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanarylsulfataseA,ASAELISA試劑盒人芳基酯酶A(ASA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物源性食品開心果(Pistachio)基因檢測試劑盒20次
HumanThymosinELISAKit人*(Thymosin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
改良Harris*100ml免費代測兔*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔內(nèi)皮素(Endothelin-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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