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線粒體超氧化物染色試劑盒BBcellProbe M1330T免費(fèi)代測

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更新時間:2017-07-06 09:12:43瀏覽次數(shù):208次

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線粒體超氧化物染色試劑盒BBcellProbe M1330T免費(fèi)代測公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

線粒體超氧化物染色試劑盒BBcellProbe M1330T免費(fèi)代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
線粒體超氧化物染色試劑盒BBcellProbe M1330T免費(fèi)代測注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1

SCN2B Others Human SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Hce-8693細(xì)胞,人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化) 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤,Rb細(xì)胞 Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi

人前列腺平滑肌細(xì)胞RNAHPSMC miRNA5 μg

ACVR2A Others Human ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人真皮成纖維細(xì)胞-新生兒裂解物HDF-n L

IGFBP6 Others Mouse 小鼠 IGFBP6 / IBP-6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

C2C12 小鼠成肌細(xì)胞

CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞

人胚腎細(xì)胞(SV40T基因修飾);293T/17 人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮黑色素細(xì)胞-中色素裂解物HELM-m L

人腦成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

3T3-E1細(xì)胞,鼠胚成骨細(xì)胞 U937(組織細(xì)胞淋巴瘤) 山羊皮膚細(xì)胞;WGS1

EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CW-2(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒 ,英文名: sTRAIL ELISA Kit

人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA檢測試劑盒HumanVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 96T/48T

食蟹猴胰高血糖素(GC)免疫試劑盒 Cynomologus Monkey Glucagon,GC ELISA Kit

CLIAKitforOPNELISAKit大鼠骨橋素規(guī)格:48T/96T

糖果糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量檢測試劑盒20

ELISAKitOrexinA人阿立新A規(guī)格:48T/96T
小鼠蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 大鼠*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒

Humananti-immunodeficiencyvirusantibody,HIVELISAKit 人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanasymmetricaldimethylarginine,ADMAELISA試劑盒人不對稱二甲基*(ADMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物源性食品土豆(potato)基因檢測試劑盒20

Humanthymicstromallymphopoietin,TSLPELISAKit人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
線粒體超氧化物染色試劑盒BBcellProbe M1330T免費(fèi)代測兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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