溶酶體染色試劑盒(綠色熒光) BBcellProbe L02250T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
溶酶體染色試劑盒(綠色熒光) BBcellProbe L02250T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
溶酶體染色試劑盒(綠色熒光) BBcellProbe L02250T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
HGC-27(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-2

CD33 Others Human 人 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

LS180細(xì)胞，人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞,MuM-2B細(xì)胞 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]

人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPMEC miRNA5 μg

CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
PANC-1, 人胰腺癌細(xì)胞

IGFBP5 Others Canine 狗 IGFBP5 / IGFBP-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC-C

犬源細(xì)胞 成纖維細(xì)胞，L929細(xì)胞 RCBBF細(xì)胞，兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞

人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5

HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HK3 Others Human 人 Hexokinase-3 / HK3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-裂解物HEK-a L

人胃癌細(xì)胞;MGC-803

Tca-8113細(xì)胞，舌鱗癌細(xì)胞 人低分化胃癌細(xì)胞,BGC-823細(xì)胞 盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS2

小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)免疫試劑盒 Human VE-cad ELISA Kit

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