細(xì)胞內(nèi)氯離子染色試劑盒500T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
細(xì)胞內(nèi)氯離子染色試劑盒500T免費(fèi)代測操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細(xì)胞內(nèi)氯離子染色試劑盒500T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HRC-99細(xì)胞，人直腸腺癌細(xì)胞系 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞,C918細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來自NIH3T3);PA12

人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞RNAHCPEC miRNA5 μg

ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
晶狀體上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

IGF2BP2 Others Human 人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1

NK-92細(xì)胞，人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞系,Hep-3B細(xì)胞 CL-0184PANC-1(人胰腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24

SLAMF1 Others Human 人 CD150 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
ITGA5 & ITGB1 Others Human 人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人表皮角質(zhì)細(xì)胞總RNAHEK tRNA

KYSE30 人食管癌細(xì)胞

CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

人胚胎心臟成纖維樣細(xì)胞;HEH2 人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒 Human aGT ELISA Kit

人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 ，英文名： EBMZ ELISA Kit

Ratintestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA試劑盒大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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小鼠*7α-羥化酶(CYP7A1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human placental alkaline phosphatase (PLAP) ELISA Kit 人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒

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humanAzidothymidine,AZISA試劑盒人*(AZT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性飼料處理試劑盒20次

Humanthrombin-antithrombincomplex,TAISAKit人*抗*復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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