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細(xì)胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-07-06 09:17:45瀏覽次數(shù):149次

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細(xì)胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說(shuō)明書(shū)公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購(gòu)!

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細(xì)胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Hs 746T(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-)

KLRC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

PC-3細(xì)胞,人胰腺癌細(xì)胞 人表皮癌細(xì)胞,A-431細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3

人晶狀體上皮細(xì)胞總RNAHLEpiC tRNA

Gibco 17100017 Collagenase Type I 1g
CM-R041大鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人脊柱間充質(zhì)干細(xì)胞HVMSC

JEG-3/VP16細(xì)胞,人絨癌細(xì)胞耐藥株 新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞,NBTF細(xì)胞 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC

IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

95-D(人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099人真皮淋巴上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1
.小鼠正常細(xì)胞

人腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg

小鼠髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC

KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22 小鼠破骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

NRK-52E,大鼠腎細(xì)胞 Rattus

EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)免疫試劑盒 Human AT2R ELISA Kit

人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 ,英文名: AAA ELISA Kit

Ratkeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanglycogensynthasekinase,GSKELISA試劑盒人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanKallikrein11,KLK11ELISAKit人*11(KLK11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human peptidylprolyl CIS trans isomerase (PPI) ELISA Kit 人肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒

HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBcelldifferetiationfactor,BCDFELISA試劑盒人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物源性飼料油菜籽(rapeseed)基因檢測(cè)試劑盒20

HumanThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細(xì)胞脂質(zhì)染色試劑盒BBcellProbe L11 500T使用說(shuō)明書(shū)人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人組胺(HIS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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