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更新時間:2017-07-06 09:24:49瀏覽次數(shù):102次
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tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1
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QGY-7701細胞,人肝癌細胞 人羊膜細胞,HA細胞 大鼠癌細胞;SHZ-88
人腎小球內(nèi)皮細胞cDNAHRGEC cDNA
Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細胞基礎培養(yǎng)基,無酚紅 500ml
氨基肽酶染色試劑盒(同時偶聯(lián)法)3×20ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
氨基肽酶染色試劑盒(同時偶聯(lián)法)3×20ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
氨基肽酶染色試劑盒(同時偶聯(lián)法)3×20ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
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*;HEL
CM-H015人支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712 小鼠腎實質細胞*培養(yǎng)基 100mL
mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞 Mouse
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大鼠血管緊張素Ⅱ轉化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒 ,英文名: ACEⅡ ELISA Kit
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大鼠c-fos 免疫試劑盒 Rat c-fos ELISA Kit
CLIAKitforsE-selectin(HumansolubleE-selectin)ELISAKit人可溶性E選擇素規(guī)格:48T/96T
*核酸蛋白結合反應試劑盒20次
ELISAKitPV-IgG人脊髓灰質炎病毒IgG規(guī)格:48T/96T
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HumanBradykinin,BKELISAKit 人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
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