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更新時間:2017-07-06 09:29:54瀏覽次數(shù):204次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
過氧化物酶染色試劑盒(氧化WG-KI法)2×10ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
過氧化物酶染色試劑盒(氧化WG-KI法)2×10ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
MA-782(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠骨髓細胞;FDC-P1
CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 人細胞裂解液 (陽性對照)
LM-6細胞,人肝癌細胞系 小鼠白血病細胞,L1210細胞 兔主動脈平滑肌細胞;SMC
人肺動脈內(nèi)皮細胞裂解物HPAECL
Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌細胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;M619
IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞
BT474細胞,導(dǎo)管瘤細胞 人絨毛膜癌,JEG細胞 人牙周膜成纖維細胞RNAHPLR miRNA5 μg
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞;B95-8
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細胞裂解液 (陽性對照)
IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺動脈內(nèi)皮細胞HPAEC
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
RT4人膀胱移行細胞瘤細胞 RT4 human transitional cell bladder papillary tumor cells McCOY's 5+10%FBS
FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白
B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人小神經(jīng)膠質(zhì)細胞HM
大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFsR-α ELISA Kit
人*α1(Thymosinα1)ELISA檢測試劑盒HumanThymosinα1ELISAKit 96T/48T
大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒 Rat SHC-transforming protein 1,SHC1 ELISA kit
CLIAKitforsPLA2(RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2)ELISAKit大鼠分泌型磷脂酶A2規(guī)格:48T/96T
肉類氟元素比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitMDC/CCL22人巨噬細胞來源的趨化因子規(guī)格:48T/96T
小鼠補體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat Pro atrial natriuretic peptide (Pro-ANP) ELISA Kit 大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒
HumanPyruvateKinase,M2-PKELISAKit 人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBonemorphogeneticproteinreceptor1A,BMPR-1AELISA試劑盒人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總吲哚-3-乙酸(IAA)熒光定量檢測試劑盒(包括萃取)20次
HumanStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
過氧化物酶染色試劑盒(氧化WG-KI法)2×10ml免費代測人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*原Ⅱ(Try-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*(trypsin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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