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更新時間:2017-07-06 09:34:13瀏覽次數(shù):115次
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福爾根染色液(Feulgen Stain)3x50ml實驗方法
黏液卡紅染色試劑盒3×50ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
黏液卡紅染色試劑盒3×50ml免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
MLTC-1(小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
人胃腺癌細胞;BGC-823
FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
CCC-HEL-1細胞,人胚肝二倍體細胞 小鼠腹水瘤細胞,SAC-II B2細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞;B95-8
細胞凍存液CFM
Promocell C-23110 Fibroblast Growth Medium KIT,成纖維細胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml
人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PG-LH7
IFNA13 Others Mouse 小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照)
MM, 小鼠小膠質(zhì)細胞
MDA-MB-157細胞,癌細胞 人胎盤絨膜癌細胞,BeWo細胞 人肺動脈內(nèi)皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg
恒河猴腎細胞;MMK2
EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人細胞裂解液 (陽性對照)
GPR56 Others Human 人 GPR56 / TM7LN4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺鱗癌細胞;NCI-H520
MDA-MB-468 人癌細胞
HCC827人非小細胞肺癌細胞 HCC827 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
SCGB1A1 Protein Human 重組人 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標簽)
人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2 人小氣道平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠抑制素B(INH-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)免疫試劑盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit
線粒體呼吸鏈復合體Ⅰ活性測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
RatlymphocytefactorELISA試劑盒大鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISA試劑盒人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit人鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat intact parathormone (i-PTH) ELISA Kit 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒
Humanproteintyrosinekinase,PTKELISAKit 人蛋白*激酶(PTK/CD115)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanBromodeoxyuridine,BrdUELISA試劑盒人溴脫氧核苷*(BrdU)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物組織線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒20次
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黏液卡紅染色試劑盒3×50ml免費代測人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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